目的:本课题应用鸡红细胞(CRBC)分别免疫小鼠，并进行其血清溶血素的测定，观察昆明山海棠根提取物对鸡红细胞致小鼠溶血素抗体生成的影响。进一步证明昆明山海棠药材中具有免疫抑制作用。并采用了现代分析技术手段液相-质谱联用(LC-MS/MS)分析对昆明山海棠药材中的有效部位进行了表征分析与鉴定，指纹图谱研究，含量测定。为昆明山海棠药材的质量控制及药效物质基础和作用机制研究奠定了基础。　　方法:(1)应用鸡红细胞(CRBC)分别免疫小鼠，并进行其血清溶血素（抗体积数）的测定，进一步观察昆明山海棠根提取物对鸡红细胞致小鼠溶血素抗体生成的影响。　　(2)用高效液相色谱法测定不同产地昆明山海棠药材中有效成分的高效液相指纹图谱，利用中药指纹图谱相似度评价系统软件分析昆明山海棠指纹图谱及不同产地昆明山海棠各成分的差异。　　(3)采用液质(LC-MS/MS)联用技术，正离子检测模式，对昆明山海棠中有效成分进行多级质谱裂解分析。以对照品及文献数据为对照，通过对各成分的MS1+和MS2+谱图的解析对各成分进行指认。　　(4)采用液质(LC-MS/MS)联用技术测定昆明山海棠药材中雷公藤吉碱及雷公藤次碱的含量。　　结果:(1)小鼠经鸡红细胞免疫后，可使血清抗体增多，即模型组HC值明显较正常组增大，差异有显著性(P＜0.01);环磷酰胺组则抑制其抗体的增加，与模型组比较HC值明显减少，差异有显著性（P＜0.01）;昆明山海棠水提取物、乙醇提取物、环已烷提取物，乙酸乙酯提取物组HC值均大于环磷酰胺组，差异有显著性（P＜0.05或P＜0.01）。其中昆明山海棠乙醇提取物组的HC值增加尤为明显。　　(2)初步建立了昆明山海棠药材乙醇部位指纹图谱，通过对指纹图谱中峰的位置、保留时间、峰面积、整体图貌等特征对照谱图进行分析，发现5个产地的昆明山海棠药材相似度达到0.9以上，但贵州雷山的昆明山海棠药材相似度小于0.85，存在差异。指纹图谱共有特征峰峰面积总和大于85％，可以作为昆明山海棠药材鉴定的标志峰。　　(3)通过液质(LC-MS/MS)联用分析给出的准分子离子峰，得到化合物相应的相对分子质量信息，再通过与参考文献报道的昆明山海棠药材中化合物的相对分子质量比对，结合部分对照品及质谱裂解规律分析，初步推断昆明山海棠药材中的20个生物碱类成分。　　(4)不同产地不同部位的昆明山海棠药材中雷公藤次碱与雷公藤吉碱的含量有一定差异，其中根皮部位中雷公藤次碱与雷公藤吉碱之和是四个部位中最高的，含量顺序为根皮＞全根＞茎＞叶。　　结论:(1)通过灌胃给予不同部位的昆明山海堂根提取物对鸡红细胞致小鼠溶血素抗体生成的影响的实验可以证明昆明山海棠有增强体液免疫功能作用。　　(2)建立了6个不同产地昆明山海棠药材乙醇部位指纹图谱，相关指纹图谱的研究数据，为昆明山海棠药材的鉴定、药效评估等质量控制提供了数据。　　(3)采用LC-MS/MS技术，通过高效液相的高分离能力分离样品中的化学成分，再利用质谱进行结构鉴定，可有效地表征其鉴定特征，适合昆明山海棠药材有效成分的鉴定。　　(4)采用液质LC-MS/MS联用技术测定昆明山海棠药材中雷公藤次碱与雷公藤吉碱的含量，此方法灵敏、准确，重复性好，为昆明山海棠药材的质量控制提供了依据。