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毛白杨(Populus tomentosa Carr.)是我国提交联合国粮农组织和环境计划署审阅重点保护的基因资源。毛白杨无论速生性、材性、抗性和美观长寿等方面,在杨属树种中均表现非常突出,在黄海流域和华北平原有着悠久的栽培历史。毛白杨遗传变异较大,生产上已选出了许多优良无性系,由于常规无性繁殖生根困难,因而严重限制了优良无性系的推广。利用组织培养技术解决毛白杨常规无性繁殖存在的问题,不仅可以获得性状高度一致的群体,而且可以大大加快良种推广的进程。 本研究选取5个优良的毛白杨无性系,取其顶芽建立无菌苗。以无菌苗的嫩茎、叶片为外植体,通过芽、叶片组织在不同培养基上的茎芽分化及生长,根的诱导等,比较了不同无性系的再生植株能力,主要结果如下: 1.5个毛白杨无性系通过器官培养途径均能再生植株,但各无性系对基本培养基、激素及其浓度配比的最佳要求各不相同。因此,离体再生植株不仅受环境的控制,而且也取决于基因型。 2.在附加0.2mg/ml的MS、WPM两种培养基上对5个无性系进行初始培养,结果表明:不同无性系在两种培养基上的反应有差异,其中3个无性系在MS上诱导率高于WPM;1个无性系在两种培养基上诱导率相同;1个无性系在MS上诱导率低于WPM。 3.以MS为基本培养基,对5个无性系分别在8种激素配比的培养基诱导茎芽分化及生长。5个无性系对不同激素配比的反应各不相同,各无性系最适宜的激素配比分别是:1号无性系BA0.3mg/l+NAA0.05mg/l;2号无性系BA0.3mg/l+NAA0.01mg/l;3号无性系BA0.5mg/l+NAA0.01mg/l;4号无性系BA0.5mg/l+NAA0.01mg/l;5号无性系BA0.7mg/l+NAA0.05mg/l。在5个无性系中,以4号无性系分化性能较好,分化芽数达17个。 4.以不同无性系无菌苗的叶片为外植体,以MS为基本培养基,添加不同浓度的BA和NAA,不同无性系叶片芽诱导及增殖适宜的最佳配比分别为:1号无性系BA0.3mg/l+NAA0.5mg/l,诱导率91.67%;2号无性系BA0.3mg/l+NAA0.5mg/l,诱导率62.4%;3号无性系BA0.5mg/l+NAA0.05mg/l,诱导率100%;4号无性系BA0.3mg/l+NAA0.5mg/l和BA0.5mg/l+NAA0.5mg/l,诱导率100%。芽增殖的激素配比分别为:1号无性系BA0.5mg/l+NAA0.03mg/l;2号、4号无性系BA0.3mg/l+NAA0.01mg/l;3号无性系BA0.3mg/l+NAA0.03mg/l。 5.以MS为基本培养基,单独添加GA3时,促进茎芽伸长,对茎芽增殖无显著影响;与BA和N从配合使用,既促进茎芽伸长,又促进芽的增殖。适于1号和2号无性系的浓度均为2.Omg/l。 6.以1/2MS为基本培养基,附加不同浓度的激素,诱导不同无性系生根,1号、2号、3号无性系在激素为N从0.01璐/1+I BAO.Zmg/l时,生根率最高,分别为96.67%、93.33%、56.67%;4号无性系在激素为IBAO.4mg/l时,生根率达最大值,为56.67%;5号无性系在激素为IBAO.Zmg/l时,生根率最好,为93.33%。