酵母新的核仁小分子RNA基因的结构和表达

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为发现新的snoTNA基因,作者根据boxC/D类反义snoRNA基因的结构特征,设计专门的程序,用计算机对国际分子生物学数据库进行搜索,结果在酿酒酵母(Saccharonyces cerevisiae)第XIII号染色体上发现了由7个snoRNA基因组成的基因簇.根据snoRNA基因簇的序列 ,合成了针对Z2到Z8 DNA的专一性的寡核苷酸探针和引物,对snoRNA分子进行实验验证.以同上寡核苷酸序列为引物,对酵母总RNA进行引物延伸分析,将得到的cDNA克隆后,进行序 列测定.用理论推算和实验的方法对Z snoRNA指导18s或25S rRNA特定位点甲基化的功能进 行了验证.为进一步研究Z2至Z8 snoRNA在酿酒母细胞中的功能,用同源重组技术对Z2至Z8 snoRNA基因进行了遗传缺失分析.为研究基因簇的表达情况,将该基因簇及上游启动子元件约2kb的片段克隆至酵母自主复制的多拷贝载体中,转化缺失该基因簇的突变株.对ZsnoRNA转录前体的加工情况进行了初步探讨.
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