Asherman综合征(Asherman,s syndrome,AS),又被称为宫腔粘连(intrauterine adhesions,IUAS),是指由宫腔手术操作、宫腔感染、放射等因素造成子宫内膜基底层被破坏导致子宫宫腔部分或全部粘连,出现周期性盆腔疼痛、月经异常、反复流产、不孕等症状的妇科疾病。近几年来的研究提出子宫宫腔基底层可能有干细胞/祖细胞存在,而宫腔粘连的发生以及复发率高可能与子宫内膜干细胞减少、缺失和功能障碍有关,故提出了使用干细胞移植治疗宫腔粘连和预防复发的新方法。本研究通过宫内灌注自体子宫内膜间充质干细胞(endometrial mesenchymal stem cell,eMSC)来治疗中、重度IUAS,通过比较分析单独使用子宫内膜间充质干细胞和联合使用透明质酸钠凝胶两种治疗方法对子宫内膜再生修复、功能恢复、容受性改变、胚胎种植率的影响,来寻求合适的治疗方案。其主要内容包括:第一部分,子宫内膜间充质干细胞分离、培养及鉴定;第二部分,子宫内膜间充质干细胞治疗AS综合征的临床观察,纳入中、重度宫腔粘连45例,随机分为实验组A(15例)、实验组B(15例)和对照组C(15例);所有患者入院后均行宫腔镜下宫腔粘连分离术(TCRA),实验组A单独使用子宫内膜间充质干细胞治疗,实验组B联合使用子宫内膜间充质干细胞与透明质酸钠凝胶治疗,对照组C仅予透明质酸钠凝胶治疗;所有患者在术后第四个月经周期均行胚胎移植术。术后于门诊复查妇科彩超及宫腔镜检查,记录患者子宫内膜厚度、美国生育协会(AFS)评分、内膜区域血流分布类型、PI值、S/D值及妊娠情况。本次实验遵循医学伦理学原则,经医院伦理委员会讨论通过。本次实验干细胞移植均未收取任何费用,所有病例干细胞移植后均未出现感染、子宫内膜异位症、肺栓塞等并发症。结果:(1)本次实验分离出的eMSC细胞形态均一,表型稳定,在体外有较强增殖能力。流式细胞仪检测结果提示与间充质干细胞表面标记物一致,且阳性率均高于98%。(2)子宫内膜间充质干细胞在透明质酸钠凝胶内能够贴壁、存活,生长状态良好。(3)当年龄﹤35岁时,单纯eMSCs移植与eMSCs和透明质酸钠凝胶联合移植均能够有效的促进子宫内膜的再生与修复;当年龄≧35岁时,eMSCs和透明质酸钠凝胶联合移植的治疗方式较单纯的eMSCs移植治疗方式更能够促进子宫内膜的增殖。(4)当年龄﹤35岁时,子宫内膜间充质干细胞联合透明质酸钠凝胶的治疗方式能够有效的促进内膜下血管生成,改善子宫内膜容受性;当年龄≧35岁时,单纯干细胞治疗方式与干细胞和透明质酸钠凝胶联合治疗方式均能够改善内膜下血管血流灌注能力,改善子宫内膜容受性。(5)当年龄﹤35岁时,干细胞和透明质酸钠凝胶联合治疗方式能够显著提高AS综合征患者术后妊娠率。此实验结果表明自体子宫内膜间充质干细胞联合透明质酸钠凝胶在临床上能促进受损子宫内膜的再生修复,改善子宫内膜容受性,恢复子宫内膜功能,最终实现成功妊娠,这说明联合应用自体子宫内膜间充质干细胞和透明质酸钠凝胶治疗AS综合征是可行的。