艾灸对环磷酰胺化疗小鼠血清集落刺激因子含量影响的量效关系研究

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目的通过观察不同的艾灸时间和艾灸高度对环磷酰胺(CTX)所致骨髓抑制模型小鼠血清粒细胞集落刺激因子(G-CSF)和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)含量的影响,研究动物实验中艾灸的量效关系,拟找出最佳的艾灸时间和艾灸高度,优化艾灸的量效标准,为今后研究艾灸改善CTX化疗小鼠骨髓抑制的动物实验提供方法学依据。方法将健康雄性昆明(KM)种小鼠42只,称量后根据体重随机分为6组,即A1B1组(2cm、2min),A1B2(2cm、3min),A1B3组(2cm、4min),A2B1组(3cm、2min),A2B2组(3cm、3min),A2B3组(3cm、4min),每组7只。小鼠按照100mg/kg/d用药量,腹腔注射CTX溶液,(按照小鼠体重0.02ml/g用药量,浓度为5mg/ml),连续3天,第3天停药后4h造模即为成功,制备成小鼠骨髓抑制模型。选取“大椎”(双)、“膈俞”(双)、“肾俞”(双)、“足三里”(双),按照分组依次进行艾灸治疗,A1B1组艾灸高度2cm,艾灸时间2min;A1B2艾灸高度2cm,艾灸时间3min,A1B3组艾灸高度2cm,艾灸时间4min;A2B1组艾灸高度3cm,艾灸时间2min;A2B2组艾灸高度3cm,艾灸时间3min;A2B3组艾灸高度3cm,艾灸时间4min,每天在相同时间段进行,每日1次,连续5天。各组小鼠每日固定专人采取尾部静脉血,人工镜检外周血白细胞计数。艾灸施治5天后的第2天,摘取眼球,取其血清,运用酶联免疫吸附试验(ELISA)观察血清中G-CSF和M-CSF的含量。实验数据应用SPSS18.0 for Windows软件进行统计分析。结果1各组小鼠造模后外周血白细胞数量较造模前均降低,且均在3次化疗后降到最低,造模3次后与造模前相比具有显著性差异(P<0.05),说明造模成功。2随着艾灸治疗的进行,各组小鼠外周血白细胞数量均呈现逐渐升高的趋势,治疗5天后达到最高,说明艾灸可以减轻CTX化疗产生的不良反应,升高外周血白细胞数量。但总体来看在艾灸对CTX化疗小鼠外周血白细胞数量的影响上,艾灸时间和艾灸高度各水平间无显著性差异(P>0.05)。3在艾灸提高CTX化疗小鼠血清G-CSF含量的疗效上,艾灸时间为2min时,G-CSF的含量最高(P<0.05),但艾灸高度各水平间无差异性(P>0.05)。4在艾灸提高CTX化疗小鼠血清M-CSF含量的疗效上,艾灸时间为3min,艾灸高度为2cm时,M-CSF的含量最高(P值均<0.05)。结论1造模前各组小鼠的外周血白细胞数量差别不明显,且均在正常值范围之内,造模后各组小鼠白细胞数量均下降,且均在3次化疗后降至最低,表明造模成功,化疗药物环磷酰胺对小鼠产生不良反应,小鼠外周血白细胞数量下降。2 G-CSF和M-CSF可以刺激骨髓造血干/祖细胞的增殖、分化,促进骨髓中中性粒细胞的产生,从而有效改善化疗后所致的骨髓抑制,恢复造血功能,提高外周血白细胞数量。从本实验来看,CTX化疗小鼠白细胞的升高与艾灸的治疗作用有关,但艾灸时间和艾灸高度两个因素下的各水平间无显著性差异。3在艾灸提高CTX化疗小鼠血清G-CSF含量的疗效上,艾灸时间为2min时,其疗效最好,但艾灸高度各水平间无显著性差异。艾灸时间和艾灸高度之间无交互作用。4在艾灸提高CTX化疗小鼠血清M-CSF含量的疗效上,艾灸时间和艾灸高度之间有交互作用,且艾灸时间为3min,艾灸高度为2cm时,其疗效最好。
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