论文部分内容阅读
朊病毒(Prion)是一种引起可传染性海绵状脑病(TSE)(亦称朊病毒病，Prion deseases)的蛋白质感染因子。其细胞型朊病毒蛋白(Prion protein，prpc)除了在神经组织、淋巴组织高表达外，在一些癌细胞如前列腺癌细胞、乳腺癌细胞、胃癌细胞中也具有较高的表达。有研究表明，prpc在神经细胞中不仅具有抗细胞凋亡的功能，还具有抗细胞自噬的功能。癌细胞中过量表达的PrPc是否与其在神经细胞中的表达，具有相同的功能，抑制了癌细胞的细胞自噬和凋亡，促进了癌细胞的生长呢?为证实这一假设，我们通过在宫颈癌Hela细胞中异源表达、在前列腺癌PC3M细胞中RNAi技术敲降prpc表达等手段，阐述了prpc参与抑制癌细胞自噬和细胞凋亡的功能。通过在低表达甚至无prpc表达的宫颈癌Hela细胞中异源表达prpc，结果发现，PrPc能抑制LC3的酯酰化，减少细胞自噬标示物LC3-Ⅱ的积累、减少自噬小体的形成，证明其具有抑制Hela细胞基础自噬和EBSS诱导的细胞自噬的功能，且其八肽重复序列在抑制癌细胞自噬功能中起到了关键作用。
本文利用RNAi技术，敲降前列腺癌细胞PC3M细胞中PrPc表达后，研究发现，PrPc能够抑制11-脱氧轮枝菌素A(ll’-deoxyverticillinA，C42)引起的细胞增殖的减少，具有抑制C42诱导的caspase-3/7活性、抑制C42诱导的PARP剪切、抑制C42诱导的caspase3依赖的细胞凋亡的功能，并能够延缓或推迟C42诱导的caspase依赖性凋亡向其他死亡方式的转换。PrPc在一些癌细胞中的丰富表达，及在癌细胞中抑制细胞自噬和细胞凋亡发生的功能，在一定程度上说明了，PrPc在非神经细胞中的高表达与该类细胞发生癌变的可能性存在一定的联系，可能与肿瘤发生进程及癌细胞耐药性具有相关性。这为进一步了解PrPc的生理功能提供了重要线索，以及为通过干扰癌细胞中prpc的表达作为癌症综合治疗的一种辅助手段提供了实验依据和理论基础。