研究背景：帕金森病(Parkinson’s disease, PD)又称震颤麻痹(Paralysis agitans),是发病率仅次于阿尔兹海默病的第二大神经退行性疾病。近年来,人们发现基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)与PD具有相关性,且基因SNPs在群体中的分布具有明显的种族特异性。PLA2G6基因,也被称作PARK14,是2009年Paisan-Ruiz等在一个常染色体隐性遗传性早发性帕金森综合征家系中发现的,但是近年来关于PLA2G6基因的SNPs与PD发病风险是否具有相关性尚无文献报道。研究目的：本研究旨在探讨四个PLA2G6的SNPs与华中地区汉族人群散发性PD是否具有相关性。研究方法：此部分实验主要采用了DNA直接测序的方法,检测了中国华中地区汉族人群531例散发性帕金森病患者和561例健康对照者的PLA2G6基因的四个SNPs:rs4375、 rs2267369、rs132985和rs2284063。实验结果：1. PLA2G6基因rs4375、rs2267369、rs132985、rs2284063在中国华中地区汉族人群中是常见的单核苷酸多态位点,不支持这四个SNPs是帕金森病的危险因素。2.将散发性PD组和正常对照组分为≤50岁人群、>50岁人群两组进行分析,结果发现PLA2G6基因rs4375、rs2267369、 rs132985、rs2284063在无论基因型还是等位基因分析均无统计学差别。3.对SNPs进行性别分层后分析发现：男性PD病人与男性正常对照组之间rs132985在基因型和等位基因方面分析都具有明显统计学意义,而两组人群根据性别进行分层后分析发现rs4375、 rs2267369、rs2284063的基因型和等位基因均无统计学差别。4.单体型rs132985A-rs2284063C在散发性PD组和正常对照组之间具有统计学意义,而其余单体型在散发性PD组和正常对照组之间均无统计学意义。结论：PLA2G6基因并不是中国汉族人群PD发病的风险基因。研究背景：PLA2G6基因位于22q13.1,其编码的蛋白质称为iPLA2VIA或iPLA2β,此基因导致PD的发病机制尚无报道。iPLA2β是磷脂酶A2(PLA2)的一种,对于维持膜的流动性具有重要的作用。研究目的：本部分实验主要研究iPLA2β酶活性下降是否通过损伤线粒体而导致细胞凋亡的发生。研究方法：本部分主要运用了MTT实验、流式细胞术,电镜观察、Western Blots实验等检测了与线粒体及细胞凋亡相关的指标。实验结果：1.MTT实验发现不同浓度S-BEL预孵育SH-SY5Y细胞可导致细胞活性出现不同程度的下降。2.运用流式细胞仪检测发现不同浓度S-BEL预孵育SH-SY5Y细胞可以导致线粒体膜电位下降。3.运用电镜检测发现不同浓度S-BEL预孵育SH-SY5Y细胞可以导致线粒体形态发生改变及细胞核固缩等改变。4. Western Blots检测发现不同浓度S-BEL预孵育细胞可以导致SH-SY5Y细胞线粒体细胞色素C释放入细胞浆内。5.Western Blots检测发现不同浓度S-BEL预孵育细胞可以导致SH-SY5Y细胞caspase9、caspase3活化。6.运用Annexin-PI检测发现不同浓度S-BEL预孵育细胞均可以导致SH-SY5Y细胞发生细胞凋亡。结论：iPLA2β酶活性下降可以通过线粒体途径导致细胞凋亡。当然本部分实验仅是细胞水平的研究,进一步的动物模型仍在构建中。研究背景：PLA2G6基因突变可导致婴儿神经轴索变性病(INAD,infantile neuroaxonal dystrophy)及常染色体隐性遗传性PD,因为部分INAD病人和常染色体隐性遗传性早发性帕金森综合征患者在MRI上脑内苍白球区域可见铁离子沉积,因此也被称作脑内铁离子沉积性疾病-2型(Neurodegenerative disorders with brain iron accumulation,NBIA-2)。散发性PD病人脑内黑质(SN)区域的铁水平增高已被证实,且已被证明为散发性PD的重要发病原因之一。铁离子增高可以导致细胞内活性氧水平增高、加重线粒体的损伤从而导致细胞凋亡的发生。研究目的：本部分主要研究iPLA2β酶活性下降是否会导致铁离子沉积、铁离子代谢障碍从而导致细胞凋亡。研究方法：本部分主要运用Perls铁染色方法观察是否存在铁离子沉积、运用Western Blots方法观察铁离子代谢相关蛋白的变化。研究结果：1.运用Perls铁染色方法发现不同浓度S-BEL孵育SH-SY5Y细胞并不能导致细胞内铁离子沉积。2.对SH-SY5Y细胞预孵育铁离子螯合剂去铁敏,并不能降低S-BEL孵育所导致的caspase3活化带的表达。3.不同浓度S-BEL孵育SH-SY5Y细胞并不能导致铁离子转运相关蛋白的表达调控发生障碍。4.不同浓度S-BEL孵育Neuro2a细胞并不能导致细胞内铁离子沉积。5.对Neuro2a细胞预孵育铁离子螯合剂去铁敏,并不能改变S-BEL孵育所导致的细胞存活率下降。6.运用不同浓度S-BEL孵育Neuro2a细胞发现铁离子代谢相关蛋白的表达变化未出现障碍。结论：iPLA2β酶活性下降不能通过导致铁离子沉积途径导致细胞凋亡的发生。当然本部分实验仅是细胞水平的研究,进一步的动物模型仍在构建中。