本研究目的在于揭示同源域基因HoxC8对成骨分化的调控作用。首先,采用半定量RT-PCR方法鉴定内源性HoxC8在小鼠胚胎发育的不同时期与体位以及不同鼠源细胞内的表达量。然后,在MC3T3-E1与C2C12两种细胞系分别建立成骨分化模型并检测不同成骨分化时期HoxC8的表达谱。接下来,在BMP2诱导的C2C12成骨分化模型中通过HoxC8过表达或RNAi的方法揭示了HoxC8对ALP与OCN基因转录的抑制作用。在此基础上,我们提出一个HoxC8参与到BMPs/Smads信号通路的工作模型。另一方面,荧光载体亚细胞定位分析表明HoxC8与Smad1共定位在细胞核内;通过荧光素酶与ChIP-PCR分析发现HoxC8通过结合ALP启动子区的HoxC8结合簇而抑制ALP启动子活性。同样的分析方法发现HoxC8可以通过与Smad1结合而间接抑制Smad6转录。对此,我们提出HoxC8控制Smad6转录的模式图。根据本文的试验结果,我们提出HoxC8在成骨分化中主要是起抑制作用。但HoxC8参与调控对于成骨细胞分化以及胚胎期骨骼的正确发育是必须的。总的来看:HoxC8通过与Smads的直接结合作用积极参与到BMPs/Smads信号通路中;通过与ALP、OCN等启动子区结合直接抑制不同时期的成骨标志基因;通过Hox家族成员之间的诱导与抑制互相制约其调控发育能力。HoxC8通过以上各个层次精确地控制着成骨细胞分化与胚胎骨发育。