生防毛壳菌的分离鉴定及其抗菌活性研究

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植物病害是由植物病原菌引起的,不仅影响农作物的产量,还降低农产品的品质,是农业生产的大敌。目前,对于防治植物病害最有效也是最为普遍的做法是施用化学杀菌剂。但是,随着化学农药的广泛应用其弊端也逐渐显现出来。于是,人们开始寻找更为安全、环保的化学农药替代品。利用微生物防治植物病害有着悠久的历史,生防微生物可以通过多种途径对病原微生物产生拮抗作用。毛壳菌是一种常见的生防菌,对多种植物病原菌具有较好的拮抗作用。本文从土壤中分离筛选出一株具有生防效果的毛壳菌,并对其抗菌活性及其成分进行了研究。简述如下:1.从土壤中分离筛选出一株具有生防效果的毛壳菌Mi2A,经形态学观察和ITS序列分析鉴定该菌为球毛壳菌(Chaetomium globosum)。2.采用菌丝生长法对其抗菌活性进行初步测定,发现该菌发酵液对6种植物病原真菌均有不同程度的拮抗作用。将该菌发酵液、菌丝、大米固体培养物分别用乙酸乙酯提取得到3种粗提物,这3种粗提物对小麦赤霉病菌(Fusariumgraminearum)、黄瓜褐斑病菌(Corynespora cassiicola)、苹果斑点落叶病菌(Alternariamali)等3种植物病原真菌都有较好的抗菌活性。其中菌丝粗提物抗菌效果最好,在1mg/mL供试浓度下对这3种植物病原真菌的抑制率均在50%以上,对小麦赤霉病菌(Fusarium graminearum)的抑制率达到71.11%。3.利用硅胶柱层析和羟丙基葡聚糖凝胶柱层析Sephadex LH-20等手段从3种粗提物中分离纯化出7种化合物,通过1H-NMR、13C-NMR等波谱技术并结合文献数据对这些化合物进行了结构鉴定。其中从发酵液中分离鉴定出两种化合物,分别为chaetoviridin B和chaetoviridin D;从菌丝中分离鉴定出两种化合物,分别为chaetoviridin E和chaetoviridinA;从大米固体发酵物中分离鉴定出三种化合物,分别为麦角甾烷-5,7,22-三烯-3-醇、chaetoglobosin G和chaetoglobosin B。其中chaetoviridin E、chaetoviridin A和chaetoglobosin B三种化合物对小麦赤霉病菌(Fusarium graminearum)、黄瓜褐斑病菌(Corynespora cassiicola)、苹果斑点落叶病菌(Alternaria mali)等3种植物病原真菌都有很好的抗菌活性。chaetoviridin A的抗菌效果最好,对上述3种植物病原真菌的EC50值分别为57.1μg/mL、102.4μg/mL和61.08μg/mL。
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