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目的为扩大益心解毒方的获益人群,以动物实验的方法探究益心解毒方对心脏舒张功能的影响；参照临床常见的中药治疗心衰的使用形式,将益心解毒方与福辛普利联合应用,并观察联合用药后的药效,进一步完善益心解毒方对气虚血瘀证心衰的药效评价,并从促进血管新生与防止重构方面解释心衰中医治疗中“益气活血”和“益气解毒”治则的机制。方法1.利用回顾性的、非比较性的研究方法,对临床冠心病患者心脏舒张功能情况及此类患者的中医证型分布进行调查。2.高位结扎左冠脉前降支以复制心力衰竭动物模型,并依据心电图结果将大鼠分为假手术组,模型组,益心解毒方高、中、低剂量组,芪参益气组,芪苈强心组,福辛普利组,地高辛组和中西医结合组。3.应用超声心动、左心导管技术对心衰大鼠基本生命体征、心脏结构和功能进行评价。4.利用病理切片染色、血生化、纤维蛋白原(Fib)检测方法,评价药效及用药安全性。5.利用分子生物学技术蛋白免疫印迹(WB)和聚合酶链式反应(PCR),对益心解毒方可能的作用机制的关键点进行检测。结果1.566例病案中EF值<50%的患者62名(10.9%),EF值≥50%的患者496名(87.6%)；E/A<0.8或>1.5的患者213名(37.6%),E/A介于0.8-1.5的患者161名(28.4%)；超声诊断中明确有舒张功能降低描述的患者有361名(59.2%),明确有收缩功能异常描述患者有26名(4.6%)且都伴随明确的舒张功能降低的描述,明确有心功能异常描述的患者有24名(4.2%),心功能大致正常描述的患者有59名(10.4%)。在舒张功能异常且有明确中医证候诊断的41例病案中共计出现气虚、血瘀、痰阻、气滞、阴虚、阳虚6个证型,单证型分布以气虚证和血瘀证最多,双证型中也以气虚血瘀证分布最多,而三证型中气虚血瘀痰阻最多。2.模型组大鼠舒张功能相关指标的评价：模型组大鼠较假手术大鼠二尖瓣减速率(MV Decel Time)绝对值下降(P<0.05),Tei指数升高(P<0.01),E/E’升高(P<0.05),左室舒张末压(LVEDP)升高(P<0.01)可为正值,左室内压最大下降速率(-dp/dtmax)绝对值显著降低(P<0.01)。3.实验中的药物对心脏舒张功能的影响：福辛普利组与模型组相比可以显著降低E/E’比值(P<0.01),较模型组大鼠左室舒张末压(LVEDP)有显著降低(P<0.01),还可显著升高左室内压最大下降速率(-dp/dtmax)绝对值(P<0.01)；地高辛组与模型组大鼠左室舒张末压(LVEDP)相比该指标有降低(P<0.05)；对于其它舒张功能指标的改善在本实验中没有体现。而本实验中所用中药,无论剂量是否不同,对舒张功能相关指标均有影响,且药效优于西药。4.益心解毒方对舒张功能的影响：益心解毒方高剂量组和低剂量组较模型组可显著升高二尖瓣减速率(MV Decel Time)绝对值(P<0.05),而其余各个治疗组与模型组相比无显著差异；高剂量组与模型组相比可以显著降低E/E’比值(P<0.01),中剂量组与模型组相比也可降低该比值(P<0.05),其余各治疗组改善不显著；益心解毒方各个剂量组与模型组相比左室舒张末压(LVEDP)和室内压最大下降速率(-dp/dtmax)的绝对值均显著升高,但是不及芪参益气滴丸在这两个指标上的改善作用。5.中西医结合治疗组对心衰大鼠心功能的影响结果：收缩功能：中西医结合组(P<0.01)和地高辛组(P<0.01)较模型组可以提高后壁的变化程度,升高EF和FS(P<0.05),且以中西医结合治疗组药效更显著。各个治疗组较模型组均可显著提高LVSP(P<0.01)和左室内压最大上升速率(+dp/dtmax)(P<0.01),各个治疗组间无差异(P>0.05)。舒张功能：除地高辛组外,其余治疗各组和模型组相比均可显著降低LVEDP,其中高剂量组、中西医结合组和福辛普利组降低幅度大(P<0.01)；同样,除地高辛组外其余各组与模型组相比均可显著升高-dp/dtmax绝对值(P<0.01)。心脏体重比：中西医结合组和福辛普利组对心衰大鼠心脏体重比的改善最为显著,与模型组相比有显著差异(P<0.01)。心肌酶：中西医结合组和福辛普利组可以显著降低在模型组中升高的血清乳酸脱氢酶(LDH)含量(P<0.01)；与模型组相比中西医结合治疗组还可降低血清肌酸磷酸激酶(CK)含量(P<0.05)；除地高辛组外,其余各治疗组与模型组相比均可降低CK-MB的含量,而中西医结合治疗组和福辛普利组降低程度最显著(P<0.01)。纤维蛋白原：中西医结合组经治疗后较模型组FIB显著下降(P<0.01)。Mallory染色的心肌病理切片观察结果：模型组心肌坏死明显,胶原纤维弥漫性生长,并侵入正常心肌组织中逐渐替代正常心肌。治疗组均可不同程度较少胶原纤维在正常心肌组织中所占的比例,高剂量组和中西医结合组的效果较地高辛组更好。6.中西医结合治疗组对心衰大鼠基本生命体征的影响：模型组、假手术组以及治疗各组在收缩压和舒张压上没有差异(P>0.05)。福辛普利组与模型组相比心率会增加(P<0.05)。7.中西医结合治疗组对心衰大鼠肝功能的影响：大鼠血清中丙氨酸转移酶(ALT)含量,除福辛普利组与假手术组相比明显升高(P<0.01)外,其余各组与假手术相比差异无统计学意义(P>0.05)。而作为心肌酶之一的天门冬氨酸氨基转移酶(AST),除地高辛组(P<0.05)与假手术相比含量显著升高,其余各组与假手术相比无统计学差异(P>0.05)。8.益心解毒方可能的作用机制靶点研究结果：用WB法检测梗死周围组织中CD31的蛋白表达,结果显示：模型组大鼠心肌组织中CD31蛋白表达量较假手术组显著下降(P<0.01),而中剂量组(P<0.05)、低剂量组(P<0.01)和芪苈强心组(P<0.05)与模型组相比均可提高心肌组织中CD31的表达。WB结果显示：模型组大鼠心肌组织中SMA-α的蛋白表达较假手术组明显升高(P<0.01),PCR检测结果显示：在模型大鼠心肌中SMA-α虽较假手术组有升高,但是差异无统计学意义(P>0.05)。WB结果显示：用药后各组的SMA蛋白表达较模型组均有显著下调(P<0.01). PCR结果显示：低剂量组较模型组大鼠SMA-α显著降低(P<0.05)。在WB和PCR中模型组大鼠较假手术组大鼠心肌组织中的vWF表达显著升高(P<0.01),高剂量(P<0.05)、中剂量(P<0.01)、低剂量(P<0.05)和中西医结合组(P<0.05)均可显著降低vWF的表达,而福辛普利组与假手术组相比可显著提高vWF(P<0.05)。PCR实验中：模型组和假手术组大鼠心肌组织在CD34表达上无差异(P>0.05),中剂量组大鼠心肌组织中CD34表达较假手术组(P<0.01),模型组(P<0.05)均显著升高；与假手术组相比,大鼠心肌组织的VEGF表达在模型组(P<0.05),高剂量(P<0.05),中西医结合组(P<0.01)均显著升高；而低剂量组大鼠心肌组织中VEGF的表达显著低于模型组(P<0.01)和其它治疗组(P<0.05)。结论1.临床上冠心病患者大部分存在舒张功能不全的现象,且大多表现为气虚血瘀证。2.益心解毒方可以改善气虚血瘀证心衰大鼠的舒张功能,机制在于其可以抑制心肌缺血引发的心肌组织中炎性因子,抑制心衰大鼠心肌细胞间质的纤维增生,降低心肌与循环中的肾素、AngⅡ水平,改善能量代谢,调节神经内分泌,保护内皮,进而降低左室僵硬度,增加左室松弛性和心肌收缩储备。3.在常规西药福辛普利应用的基础上加用益心解毒方中剂量安全有效,可以增加其改善心功能的效力,并且不会影响心衰大鼠的血压、心率等基础生命体征,并无肝功能损伤的加重。4.机制研究发现①益心解毒方具有促进血管新生,保护内皮功能和抑制心肌纤维化的作用。②“益气活血”的中医治则可能与血管新生以及保护血管内皮的机制相关联。③“益气解毒”的中医治则可能与改善心室重构以及心脏舒张功能相关联。④随着剂量的增加,益心解毒方可能出现了从“益气活血”到“益气解毒”治则偏重的不同改变。