本论文聚焦中药活性成分经典色谱筛选方法效率较低的问题,围绕内皮素A受体(Endothelin A receptor,ETAR)色谱方法的建立及应用展开研究,明确了中药经典方剂四物汤中ETAR靶向活性成分及其与该受体的相互作用,有望为其他中药活性成分的快速筛选提供方法学借鉴。全文共分4章,主要内容如下:1.建立了ETAR色谱方法。大肠杆菌表达重组EGFR(Epidermal growth factor receptor,EGFR)-ETAR,通过EGFR与其底物依鲁替尼修饰硅胶间特异性共价作用完成ETAR固定化;采用X射线光电子能谱、X射线能谱分析和扫描电镜表征固定相表面元素组成和形态学,工具药马西替坦、波生坦、安倍生坦和磺胺二甲异噁唑表征固定化受体的保留活性和稳定性。结果表明,固定化ETAR色谱方法具有特异性识别和分离配体的能力,稳定性良好,为其他受体色谱固定相的制备提供了方法学借鉴。2.基于ETAR色谱,建立了药物和受体相互作用研究方法。以马西替坦、波生坦、安倍生坦和磺胺二甲异噁唑为工具药,利用ETAR色谱结合吸附能量分布(Adsorption energy distribution,AED)模型分析ETAR和药物的相互作用,并与传统的前沿分析法、直接进样法进行比较。结果显示,四种配体在ETAR色谱柱上的吸附行为均符合双朗格谬尔模型,与受体的亲和均存在两类结合位点,亲和力大小为波生坦>马西替坦>安倍生坦>磺胺二甲异噁唑。上述结果提示ETAR色谱结合AED模型分析可为药物-受体相互作用研究提供方法学参考。3.基于ETAR色谱,明确了四物汤受体靶向活性成分及其与ETAR的相互作用。运用ETAR色谱筛选四物汤的靶向活性成分,表征活性成分与ETAR的结合参数,分子对接初步验证活性成分与受体的结合活性。结果显示,芍药苷与阿魏酸为四物汤靶向作用于ETAR的活性成分,芍药苷在固定化ETAR上存在一类结合位点,阿魏酸在固定化ETAR上存在两类结合位点;两种活性成分以类似拮抗剂的模式与ETAR结合,为四物汤其他靶向成分的筛选分析奠定了方法学基础。