中枢神经系统(CNS)损伤后神经功能的恢复极为困难,主要原因是因为脑内神经元的再生能力极差。目前研究在脑内虽然有神经干(NSC)细胞存在,能分化成神经元,但是由于神经干细胞存在的部位很局限,数量非常少,故其对神经元损伤修复的能力是很有限的。近年的研究表明其他部位的干细胞可以分化成神经细胞。在动物实验中通过移植其他来源的干细胞(胚胎神经细胞,脐血干细胞等)到受损伤的脑内,可以有限地改善受损伤的神经功能,但是由于伦理道德,免疫排斥等原因使其他来源的干细胞并不能在临床实际中广泛应用。骨髓间充质干细胞可在自体获得并在体外可诱导分化成神经细胞,但是目前还不能有效稳定地表达神经细胞特性,故探索一条有效的途径使骨髓间充质干细胞分化成神经细胞后通过细胞移植治疗中枢神经系统损伤是非常有必要的。许多相关研究结果提示通过细胞融合可能会促进骨髓间充质干细胞稳定分化成其他组织细胞,而骨髓间充质干细胞与皮质神经元细胞融合尚未见相关报道,所以我们设想通过骨髓间充质干细胞与神经元细胞融合探索骨髓间充质干细胞稳定地分化成具有神经元特性的可增殖细胞的可能性,为细胞移植治疗中枢神经系统损伤探索更好的供体细胞。本实验的主要实验设计为培养扩增骨髓间充质干细胞,分离获得胚胎神经元细胞,融合骨髓间充质干细胞和神经元细胞后进一步观察其增殖和分化情况。方法:实验分为三个部分:1.采用贴壁法培养大鼠骨髓间充质干细胞,通过细胞形态学特点和表面抗原CD44,CD45,CD90对其进行鉴定。融合前用BrdU标记大鼠骨髓间充质干细胞。2.在不同的妊娠时间用BrdU标记胎鼠皮质神经细胞,观察胎鼠皮质发育情况。分离E17天胎鼠大脑皮质神经细胞鉴定其中神经元细胞的比例,用于与骨髓间充质干细胞融合。3.用PEG介导大鼠骨髓间充质干细胞与胎鼠皮质神经细胞融合;对融合后的细胞行抗-NeuN和抗-BrdU免疫荧光双标染色,以及抗-MAP2免疫细胞化学染色。结果:1.成功培养大鼠骨髓间充质干细胞,形态学上符合骨髓间充质干细胞生长特点,经