梅(Prunus mume Sieb.et Zucc.)是蔷薇科李属多年生核果类植物。梅果实营养丰富,含有多种利于人体代谢的氨基酸,被誉为健康食品。雌蕊是果实形成的基础,而在生产中,经常出现雌蕊发育不良的现象。为揭示梅雌蕊发育的调控机理,本研究以果梅栽培品种‘小绿萼’为研究材料,用石蜡切片法研究‘小绿萼’的雌蕊分化特征;用扫描电镜观察‘小绿萼’雌蕊的细微结构;测定‘小绿萼’无雌蕊花(又称空心花或雌蕊败育花)和多雌蕊花(完全花)的木质素含量;制备CCoAOMT蛋白抗体,建立适合果梅蛋白的westernblot反应体系;采集‘小绿萼’生长期花茅,用CCoAOMT蛋白抗体进行RIP-seq试验,主要结果如下:1对果梅栽培品种‘小绿萼’雌蕊分化进程进行研究,结果表明:多雌蕊形成的关键时期为雌蕊原基分化初期。12月4日之后,雌蕊子房部位开始出现表皮毛。雌蕊分化完成后,‘小绿萼’开始出现雌蕊发育异常;盛花期,‘小绿萼’的无雌蕊花(空心花)比例为18%。无雌蕊花的木质素相对含量明显低于多雌蕊花的木质素相对含量,说明木质素的含量与雌蕊发育存在联系。2制备CCoAOMT蛋白抗体和建立梅的Westem-blot反应体系,结果表明:成功制备了符合进一步试验要求的梅CCoAOMT蛋白多克隆抗体;SDS上样缓冲液直接提取法对果梅蛋白质提取效果良好;梅的Westem-blot体系是,SDS-PAGE电压80V/120V,总蛋白上样量30 μg,转膜1 h,一抗稀释比例1:1 000以及一抗孵育2 h。3 RIP技术挖掘雌蕊形成关键基因。运用RIP-seq技术对CCoAOMT蛋白相关的RNA进行了分析:Ctl(对照组)和RIP(实验组)转录组重测序分别获得57772404、46819880条原始测序序列(Rawreads),过滤后获得57402032、46572600条序列(Clean reads);共筛选出710个差异表达基因,其中RIP相对Ctl上调表达的有203个,下调表达的有507个。其中和AP2转录因子相关的基因(Prupe.6G126400)可能和花器官发育相关,和C3H转录因子相关的基因(Prupe.5G040400)可能调控木质素的生物合成,值得进一步研究。对这710个差异基因进行GO富集分析,能够注释到GO分支的显著性差异表达基因总数为476个,显著性差异表达基因主要集中在生物过程类和分子功能类,有7个基因与木葡聚糖:木葡糖基转移酶活性相关;KEGG富集分析表明差异表达基因共富集于63个KEGG途径,与该Pathway相关的差异表达基因是229个,差异基因在苯并恶嗪类生物合成、植物与病原菌的相互作用和次生代谢产物的生物合成中富集程度最为显著,说明雌蕊的发育过程是多基因、共同调节的结果。