【摘 要】
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HIV-1 广谱中和抗体(Broad spectrum neutralizing antibodies,bNAb)可以靶向HIV-1包膜糖蛋白亚基上的抗原表位,并表现出广泛的抗HIV-1活性。在我们的研究中,我们借助糖基-磷脂酰肌醇(Glycosylphosphatidylinositol,GPI)将 3BNC117、N6、PGT126、PGT128、35022 和 10E8 的单链可变区片段(S
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HIV-1 广谱中和抗体(Broad spectrum neutralizing antibodies,bNAb)可以靶向HIV-1包膜糖蛋白亚基上的抗原表位,并表现出广泛的抗HIV-1活性。在我们的研究中,我们借助糖基-磷脂酰肌醇(Glycosylphosphatidylinositol,GPI)将 3BNC117、N6、PGT126、PGT128、35022 和 10E8 的单链可变区片段(Single-chain fragment variable,scFv)以及单域抗体m36.4表达至HIV病毒靶细胞表面的脂筏区域。我们发现所有GPI-scFvs或GPI-m36.4均可在转导的靶细胞表面上实现有效表达,并被靶向于脂筏区域,且不会影响CD4,CCR5和CXCR4的表达。转导的TZM.bl细胞对HIV-1不同毒株的感染表现出不同程度的抗性,而被GPI-10E8以及GPI-m36.4转导的TZM.bl细胞可实现对各种亚型HIV-1分离株的完全抑制。此外,我们还证实GPI-10E8或GPI-m36.4可有效阻断HIV-1的细胞-细胞间传播和由多种HIV-1 Env介导的细胞融合,特别是GPI-m36.4可使细胞对其产生完全抗性。而表达GPI-m36.4和GPI-10E8的人T细胞系也表现出了对HIV-1感染的抗性,并且在HIV-1病毒感染期间,显示出比未修饰细胞更加明显的选择性存活和扩增优势。此外,我们还发现,GPI-10E8和GPI-m36.4可以极大地影响HIV-1 Env糖蛋白的加工和病毒的释放以及感染性。总而言之,我们的研究确定了 m36.4和10E8可通过GPI锚作为膜结合病毒进入抑制剂进行HIV抗性细胞的基因治疗策略研究。
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