四川地区鸭源大肠杆菌多重耐药性及可移动遗传元件多样性的调查研究

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大肠杆菌是自然环境中最常见的微生物之一,并在人类和动物的胃肠道广泛共生,因此大肠杆菌被认为是研究抗生素耐药性流行与传播的理想指示性微生物。本研究开展对四川地区鸭源大肠杆菌可移动遗传元件和耐药性的调查研究,结果如下:1.大肠杆菌可移动遗传元件的流行情况及耐药性调查2018-2021年从四川省13个地区收集到病鸭样本273份,从中分离得到241株大肠杆菌,对其进行整合子和可移动遗传元件的筛查发现,整合酶int I1、int I2的阳性率分别为82.57%(n=199)、16.18%(n=39)。77株整合酶阳性菌株携带可变区基因盒,其由17种不同的阵列类型组成,其中以dfr A27+arr-3(n=23)最常见。可移动遗传元件中IS26的检出率最高,达到100%,其次检出率较高的有tnp A/Tn21(64.73%)、trb C(61%)。药敏结果表明241株大肠杆菌对10种抗生素的耐药率在80%以上,以氟苯尼考的耐药率(97.93%)最高,其中1株大肠杆菌仅对利福平耐药,其余240株大肠杆菌为多重耐药菌株,耐药重数在3-11重之间,最常见的是对8类抗生素表现耐药。通过相关性分析发现本研究的整合子阳性菌株更容易对氨苄西林、氯霉素、复方新诺明、甲氧苄啶产生耐药性(P<0.05)。2.大肠杆菌整合子的可转移性通过接合转移实验,共筛选得到26株含有整合酶的接合子,其中16株携带基因盒,其接合转移频率在2.70×10-6~6.70×10-2。随机选取4株供体菌及对应的4株接合子进行S1-PFGE检测,发现供体菌和接合子中含有相同大小的质粒,且该质粒携带int I1。接合子耐药表型检测结果表明,基因盒从供体菌转入受体菌之后,使接合子几乎都获得了对相应抗生素的耐药性。MIC结果表明,相较于受体菌,接合子对甲氧苄啶的抗性提高了大于512倍。对16株接合子进行质粒复制子分型,在6株接合子中检出FIB类型质粒,在5株接合子中检出Frep B类型质粒,在2株接合子中检出Inc X1类型质粒,未在余下3株接合子中检出具体分型。综上,本研究发现分离株中可移动遗传元件具有多样性,整合子与大肠杆菌的耐药性具有显著相关性。且进一步证实整合子能够跟随质粒发生转移,并将相应耐药表型转移给受体菌,这种耐药性的水平转移方式对公共卫生安全具有威胁性。
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