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复方黄芪制剂由黄芪、茯苓、鱼腥草、当归等中药组成,为了深入探讨其作用机理,我们进行了复方黄芪制剂对小鼠免疫调节作用的血清药理学研究。本实验首先研究复方黄芪制剂含药血清的制备和体外血清添加量,探讨复方黄芪制剂血清药理学的实验方法。其次通过复方黄芪制剂含药血清对小鼠T淋巴细胞增殖、IL-2活性时-效关系的研究,探讨复方黄芪制剂的药理作用及其免疫调节作用的部分机制。 本实验设立三个剂量组即低剂量组、中剂量和高剂量组,分别灌胃1d、3d和6d,用MTT法,观察不同的给药剂量、给药天数的含药血清对脾淋巴细胞增殖作用,确定最佳血清制备方案。结果表明,与空白组比较,灌胃1d的低剂量组、中剂量和高剂量组血清有促进T淋巴细胞增殖的作用,但无明显差异。给药3d,中、高剂量组都能极明显的促进脾淋巴细胞增殖转化(P<0.01),但中剂量组的OD值比高剂量组的高,且差异极显著(P<0.01)。灌胃6d的中剂量也有明显促进T淋巴细胞增殖(P<0.01)。中剂量,给药6d与给药3d比较,差异极显著(P<0.01)。由此说明最佳的给药剂量应该是中剂量即25g/kg体重,给药天数6d。 在确定最佳的血清制备方案后,我们探讨了体外实验系统中的血清添加量问题。本文设立空白血清组和试验血清组,血清添加量分别添加5%、10%、20%、40%、80%和100%,用MTT法,观察不同的血清添加量、不同孵育时间对脾淋巴细胞增殖作用,确定最佳血清添加量。结果表明,含复方黄芪制剂的血清与脾淋巴细胞共同孵育48h,在血清添加量20%与40%时有极明显的促进细胞增殖的作用(P<0.01),当血清添加量达到100%的情况下,表现出一定的抑制细胞增殖的作用。而孵育72h,只有血清添加量20%有极明显的促进细胞增殖的作用(P<0.01),血清添加量达80%时即出现明显的抑制细胞增殖的作用(P<0.01)。由此说明最佳的血清添加量应该是20%或40%。 为了进一步探讨复方黄芪制剂的药理作用,我们应用中药血清学方法,观察其对小鼠免疫功能的影响。实验小鼠按25g/kg体重复方黄芪水煎剂灌胃,于给药后15min、30min、1h、1.5h、2h、2.5h、3h、4h分别在无菌条件下取血,分离