【摘 要】
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每年爆发流感都严重威胁全球卫生安全,导致严重的经济损失以及人员伤亡。接种流感疫苗仍然是目前预防流感病毒感染最有效的手段。临床研究表明接种传统灭活流感病毒疫苗诱导神经氨酸酶特异性抗体反应较弱。然而,感染流感病毒诱导的神经氨酸酶抑制性抗体滴度水平与临床上免疫保护效力紧密相关。本课题组主要研究方向之一是基于甲型流感病毒神经氨酸酶研制广谱流感疫苗。为优化诱导神经氨酸酶广谱抗体的免疫程序,本课题尝试通过体内
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每年爆发流感都严重威胁全球卫生安全,导致严重的经济损失以及人员伤亡。接种流感疫苗仍然是目前预防流感病毒感染最有效的手段。临床研究表明接种传统灭活流感病毒疫苗诱导神经氨酸酶特异性抗体反应较弱。然而,感染流感病毒诱导的神经氨酸酶抑制性抗体滴度水平与临床上免疫保护效力紧密相关。本课题组主要研究方向之一是基于甲型流感病毒神经氨酸酶研制广谱流感疫苗。为优化诱导神经氨酸酶广谱抗体的免疫程序,本课题尝试通过体内实验研究前期甲型流感病毒感染对后期接种神经氨酸酶免疫原诱导的免疫反应广谱性的影响。试验方案设计在接种重组蛋白之前先滴鼻感染少量A/Hong Kong/1/1968（H3N2）,测定血清特异性lg G滴度并且在第二次蛋白免疫之后感染8×LD50 A/Guizhou/54/1989（H3N2）异种流感病毒,每天观察记录体重和存活变化。该研究工作旨在分析前期甲型流感病毒感染如何影响后期接种神经氨酸酶免疫原诱导的免疫反应强度和广谱性。我们成功构建pFastbac Dual-N2和pFastbac Dual-N9重组质粒,通过昆虫表达系统成功表达N2和N9重组蛋白,采用鸡胚扩毒方法成功扩增A/Hong Kong/1/1968（H3N2）和A/Guizhou/54/1989（H3N2）两种甲型流感病毒并进行LD50毒力检测。实验结果表明前期流感病毒感染能够增强神经氨酸酶重组蛋白诱导的特异性抗体滴度和交叉反应性。致死剂量H3N2小鼠攻毒实验结果表明前期甲型流感病毒感染对小鼠后期感染A/Guizhou/54/1989（H3N2）流感病毒具有提升保护作用的效果,不仅提高小鼠的存活率,而且有效减缓小鼠体重下降。
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