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研究目的酒精依赖综合征(alcohol dependence syndrome, ADS)俗称酒依赖、酒精成瘾等,是酒精滥用引起的的一种严重的复杂疾病,它的发生发展和临床症状的维持受遗传,心理和环境等多重因素的影响。家系调查和双生子研究表明遗传因素在酒依赖形成过程中起着重要的作用。通过对相关基因多态性的研究,已经有很多的基因被证实与酒依赖有关,但还是存在一定的争议性。此外在不同的地区和种族研究结果也存在差异。目前,国内相关研究大部分只集中在汉族,少数民族的相关研究很少。本研究通过对云南苗族与彝族酒精依赖综合征患者组和健康对照组酒精代谢相关基因的7个多态位点进行检测,探讨在云南苗族与彝族人群中酒精依赖综合征与7个侯选多态位点的遗传学关系,为酒依赖的预防、诊断及个性化的治疗提供一定的理论依据。研究方法按照《精神疾病诊断及统计手册第4版》(Diagnostic&Statistic Manuel of Mental Disorders Ⅳ.DSM-Ⅳ)诊断标准,选择云南苗族人群和彝族酒依赖综合征患者分别为30和110例作为研究对象,同时选取与上述病例组相匹配的107例和333健康者作为对照。各样本抽取静脉血200μ1,通过饱和酚／氯仿法提取DNA,采用聚合酶链式反应-限制性片断长度多态性(Polymerase Chain Reaction-Restriction Fragment Length Polymorphism, PCR-RFLP)分析技术和测序技术检测酒精依赖综合征患者组和健康对照组在7个候选位点中的基因型和等位基因频率。应用SPS S17.0、Haploview、HWSIM和(?)SHEsis等软件对结果进行统计和分析。研究结果1、单位点分析结果本实验ADH1B基因rs2066702和rs75973598以及ALDH2rs671在云南苗族、彝族酒依赖组与健康对照组均只检测到一种等位基因与基因型；云南苗族CYP2E1基因rs3813867、rs6413432和rs2070676位点与酒精依赖无相关关系；云南彝族ADH1Crs698位点与CYP2E1基因rs3813867、rs6413432位点与酒精依赖无相关系,rs2070676酒依赖组A1A1、A1A2、A2A2三种基因型频率为1.8%、53.6%、44.6%,健康对照组三种基因型频率为3.4%、31%、65.6%,两组间基因型分布存在显著差异(X2=18.23,p<0.001)；两组A1等位基因频率分别为28.6%、18.9%,A2等位基因频率分别为71.4%、81.1%,其等位基因分布存在也存在显著差异。A1A1和A1A2基因型的携带者酒依赖发生率相对升高。2、单倍型分析结果对CYP2E1基因rs3813867、rs6413432、rs2070676单倍型分析,云南苗族共构建8种单倍型,有7种单倍型在酒依赖组或健康对照组的频率大于0.01。总体检验显示CYP2E1基因酒精依赖组和正常对照组间的单倍型分布没有显著差异(P=0.728>0.05)。彝族共构建8种单倍型,有7种单倍型在酒依赖组或健康对照组的频率大于0.01。总体检验显示CYP2E1基因酒精依赖组和正常对照组间的单倍型分布有显著性差异。H7(GTG)单倍型携带者患酒精依赖风险显著升高；H5(GAG)、H6(GTC)单倍型携带者患酒精依赖风险显著降低。3、苗、彝族健康对照组等位基因与基因型分布情况分析在CYP2E1基因的三个位点rs3813867、rs6413432、rs2070676中,rs3813867等位基因与基因型都存在显著差异,苗族c2等位基因频率显著高于彝族；rs6413432位点等位基因与基因型都存在显著差异,D等位基因频率彝族显著高于苗族；rs2070676位点等位基因与基因型分布在两民族之间大致相同。4、连锁不平衡分析云南苗族中,rs6413432、rs2070676之间存在强连锁(D’>0.8),在酒依赖组连锁强度更强(D’=0.99>0.8),而rs3813867与rs6413432、rs2070676之间连锁强度较弱(D’<0.8)；云南彝族中,rs3813867、rs6413432、rs2070676之间连锁不平衡弱(D’<0.8),但在酒依赖组中rs6413432和rs2070676存在强连锁(D’=0.99>0.8)研究结论云南苗族rs3813867、rs6413432、rs2070676位点多态性与酒依赖无相关关系。云南彝族rs698、rs1813867、rs6413432位点与酒精依赖综合征无相关关系,rs2070676位点A1A1和A1A2基因型的携带者比A2A2基因型携带者患酒依赖的相对风险高。在云南彝族Al等位基因是可能是酒精依赖的危险因子,在酒依赖发生过程中起到一定的作用；H7(GTG)单倍型携带者患酒精依赖风险显著升高；H5(GAG)、H6(GTC)单倍型携带者患酒精依赖风险显著降低。CYP2E1基因rs3813867,苗族c2等位基因频率显著高于彝族；CYP2E1基因rs6413432位点D等位基因频率彝族显著高于苗族；rs2070676位点等位基因与基因型分布在两民族之间大致相同。云南苗族彝族,酒依赖组rs6413432和rs2070676均存在强连锁(D’=0.99>0.8)。