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目的乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)垂直传播是指HBV以生殖细胞作为载体,把HBV DNA带入胚胎,使子代发病或成为HBV携带者的一种新的、尚待证明的传播方式。HBV父婴垂直传播研究的关键点在于阐明HBV通过血睾屏障转染精子的途径。本课题通过活体转染不同组的大鼠睾丸,旨在探讨机体大量摄入乙醇后,血睾屏障(blood-testis barrier,BTB)的结构完整性和生理机能的改变,以及能否有效阻止含HBV DNA的质粒转染生精小管生精上皮细胞,并进一步探讨影响BTB完整性的因素和作用机制。方法取20只Wistar成年雄性大鼠随机分为两组,每组10只。A组为实验乙醇组,每只按1ml·100g-1·d-1灌胃50%乙醇,连续40天;B组为空白组,每只按1ml·100g-1·d-1灌胃生理盐水,连续40天。向睾丸转染含HBV DNA的质粒,应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)、实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR, Real-time PCR)、原位杂交(in situ hybridization, ISH)和透射电子显微镜(transmission electron microscopy, TEM)检测睾丸组织HBV DNA的转染情况。结果①PCR:A组样本可见特异的HBV DNA阳性条带;②通过Real-time PCR的检测发现A组HBV DNA平均含量高于B组,差异有统计学意义;③原位杂交:A组发现阳性杂交信号弥散,可被广泛发现于生精上皮基底室和近腔室的生精细胞上;④TEM:A组大鼠睾丸的生精小管基膜厚薄不均,基膜组织疏松增厚,成波浪式皱褶,可见基膜断裂,精原细胞与支持细胞及生精小管的基膜之间出现较多空泡,生精小管、生精上皮、生精细胞及支持细胞与相邻细胞之间的间隙扩大。结论①乙醇的摄入会破坏大鼠睾丸血睾屏障的完整性,引起生精小管的基膜、支持细胞等超微结构异常;②血睾屏障的损伤及生精小管的结构异常可以导致大鼠睾丸的整个生精上皮易受到HBV DNA的转染,造成转染率的升高。血睾屏障是支持细胞的主要功能之一,它保护着处于分化状态的生精细胞,防止自身免疫反应,并具有调控生精细胞分裂和分化,维持曲精小管内有利于精子发生和成熟排放的特殊微环境等重要作用。血睾屏障的完整性是其起保护功能的重要基础,乙醇可以破坏其完整性,使全部生精细胞易受HBV的感染。