目的：异常糖基化与肿瘤的发生发展有着密切的关系，肿瘤组织中异常表达的N-糖可能作为一种肿瘤诊断的标志物以及肿瘤治疗的靶点。运用糖组学分析方法，分析结直肠癌组织和癌旁组织中差异表达的N-糖，并进行详细的多级质谱解析，筛选出结直肠癌特征性表达的N-糖，为结直肠癌的的诊断、治疗提供新的靶点，并为异常表达的N-糖在结直肠癌中发生的生物学作用的研究提供结构基础。　　方法：（1）从结直肠癌和食管鳞癌患者癌组织及癌旁组织中提取蛋白，用WM10000的透析膜去除裂解液中的盐离子；（2）应用PNGaseF酶释放蛋白上的N-糖链，通过C18柱和PGC柱进行纯化，并对糖链进行还原处理；（3）对还原和纯化过的糖链进行甲基化衍生，以提高质谱的响应强度；（4）运用LTQ-ESI-MS检测来自癌组织和癌旁组织中的N-糖，并采用多级质谱离子碎片进行结构鉴定，分析其详细的分支和连接方式；（5）应用t检验、偏最小二乘法显著性分析（PLS-DA）、受试者特征工作曲线等多种统计学方法分析质谱数据，筛选具有指标性意义的N-糖链。　　结果：（1）从43对结直肠癌组织中成功提取出N-糖，并通过一级质谱检测，癌组织和癌旁组织在一级质谱上具有一定差异；（2）提取出的N-糖链变量经统计分析得出11种N-糖在结直肠癌癌组织中较癌旁组织有明显变化，其中bisecting结构的N-糖荷质比（M/Z）973，1060，1075，1162，1177，1264，1352在癌组织中显著下降；M/Z1055，1279分别是双天线和三天线末端Gal的复杂型N-糖，在结直肠癌组织中显著下降；M/Z1116是高甘露糖型的N-糖，M/Z1228是双岩藻糖基化的N-糖，在结直肠癌组织中上升；（3）通过ROC曲线分析发现bisecting结构的N-糖的AUC值达到0.814，具有较高的诊断特异性和灵敏性；（4）通过多级质谱分析结果发现，含有双岩藻糖的N-糖，M/Z1228,1352中的660碎片离子为Lewis A，Lewis X和H2结构的混合物，在癌组织和癌旁组织中共同存在；（5）将43例结直肠癌病人的癌组织和癌旁组织进行临床分期，发现bisecting结构的N-glycan的表达量随着分期的增加（癌旁组织、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期）呈递减的趋势；（6）对bisecting类的N-糖和患者年龄进行相关性分析，发现bisecting结构的N-glycan可能作为临床诊断指标与患者年龄并无相关性（P>0.05）（7）作为对照，我们在食管鳞癌中并未发现癌组织中bisecting结构的N-糖有变化。　　结论：通过收集结直肠癌临床组织样本，进行N-糖提取，一级及多级质谱分析，发现了很多差异表达的N-糖，其中bisecting结构的N-糖在肿瘤组织中明显下降，M/Z1055,1279双天线和三天线末端Gal的复杂型N-糖下降。并且发现bisecting结构的N-糖其AUC值达到0.814，具有较高的诊断特异性和灵敏性，而在同为消化道肿瘤的食管鳞癌中并无发现同样的现象，说明这些异常的N-糖可能是结直肠癌特异表达的，其下降和结直肠癌的分期具有显著的相关性，随着结直肠癌肿瘤分期的加深，其下降越明显，说明bisecting结构的N-糖和肿瘤的恶性程度密切相关，这可能为结直肠癌的诊断和靶向治疗提供新的靶点。