葡萄灰霉病抗性遗传及相关SSR标记筛选

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葡萄灰霉病是严重危害葡萄产业的一种真菌病害,其病原菌为灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea Pers.)。大多数葡萄品种都非常容易受到灰霉病的侵染,导致果园葡萄形成破坏性腐烂或鲜食葡萄采后腐烂,会造成巨大的经济损失。除了化学防治、生物防治等形式,葡萄品质的提升长久以来都是葡萄生产者和科研人员的重点目标,因此要综合防治葡萄病虫害,发掘葡萄的抗病资源,进行抗病杂交育种,选育优良品种株系,从而长效控制葡萄真菌病害。本研究以不同寄主灰霉菌菌株、不同葡萄品种及6个杂交组合F1代群体为试验材料,研究了不同灰霉菌株在不同时期的形态、致病力分化,筛选抗病性试验所用菌株;鉴定不同品种葡萄的叶片和果实对灰霉菌的抗型类型,对6个F1代杂交群体进行抗性遗传分析,并采用SSR分子标记进行葡萄抗灰霉病基因的分子标记分析。取得主要结果如下:1、7株灰霉菌中YL-RG的生长速度最快,YL-ADY的生长速度最慢;第14天时灰霉菌形态型变异为两大类,即菌丝型(M1、M2、M3、M4、M5)和菌核型(S1、S2);第21天时菌株YI-RG、YL-BF、YL-FQ能够产生大量灰褐色菌丝和分生孢子;菌株YL-RG在葡萄叶片上致病性最强,菌株YL-FQ在刺伤番茄果实上致病性最强。综合选定YL-RG为后续葡萄材料抗病性鉴定所用菌株。2、在葡萄叶片抗性鉴定中高抗品种有3个(紫秋、北玫、北红),抗病品种有2个(雪兰红、金手指),高感品种有2个(戈壁新秀、红地球);在葡萄果实抗性鉴定中高抗品种有3个(玫瑰香、双优和紫秋),抗病品种有3个(双红、东方之星和北红),感病品种有4个(摩尔多瓦、戈壁新秀、北玫、天缘奇),高感品种有3个(红地球、金手指和雪兰红);同一葡萄品种叶片与果实对灰霉病的抗性结果存在差异;6个杂交组合中,‘戈壁新秀’ב北玫’杂交组合F1代群体抗性并未产生分离,其他5个组合F1代均产生了抗性分离,存在4个抗性类型,‘红地球’ב北玫’和‘北红’ב金手指’这两个组合具有选育出抗病单株潜力。3、126对引物初筛6个组合的抗感病亲本,多态性引物数量最多的是‘北红’ב红地球’,‘戈壁新秀’ב雪兰红’的多态性比率最低,复筛后共筛选出30对稳定性高的多态性引物;选取10对引物对‘红地球’ב紫秋’组合杂交后代的极端抗性单株进行真假杂种鉴定,结果表明61株F1代的真杂种率为59.02%,引物VMC9D3、Vr ZAG62、VMC9F4、VVMD24的鉴定率一致且最高,引物VMCNG4B9鉴定率最低;用所筛选出的30对多态性引物对混池进行抗、感连锁SSR分子标记筛选,未能有引物在抗感基因池间扩增出差异性条带。
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