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森林经营与管理是我国森林高质量发展和森林效益提升的重要途径和保障。以森林可持续经营为核心,在维持森林健康生长和森林多种服务功能的基础上,对非木质森林资源的评价与高值化利用,是进一步提升森林经济效益的有效措施。本文以药用工业银杏原料林的非木质资源(银杏叶)为研究材料,对银杏叶活性成分动态变化规律进行了评价,并对其加工利用关键技术进行了系统研究,最后对未被充分开发的双黄酮类成分进行了进一步的功能评价,为银杏非木质资源的可持续利用和高值化利用提供科学依据。取得结果如下:1.建立了同时检测分析银杏叶资源中的3种黄酮醇苷、4种萜内酯和4种双黄酮类化合物的超高效液相色谱串联质谱多反应监测方法,为银杏叶资源的开发利用提供质量评价方法。色谱条件:Agilent Eclipse Plus C18 RRHD(2.1 mm×50mm,1.8μm),柱温35℃;流动相A为乙腈,B为0.1%甲酸水溶液;梯度洗脱程序:0~0.5 min,12~20%(A);0.5~6min,20~45%(A);6~12min,45~55%(A);12~13min,55~80%(A);13~15 min,80~12%(A);体积流量0.2 m L/min,进样量2μL。质谱条件:多反应监测模式,喷雾电压3500V,雾化温度300℃,雾化气25psi,气帘气流速10 L/min。2.明确了银杏叶资源活性成分动态积累变化规律及其生物合成调控关键基因的表达特征。雌株银杏叶各组分含量明显优于雄株,且叶片更加厚实。白果内酯成分含量随叶片的不断衰老而逐渐降低,黄酮醇苷类成分随银杏叶片的不断衰老呈现上升趋势。除金松双黄酮外,双黄酮类成分含量呈现“先减少后增加”趋势。银杏黄酮和萜内酯含量与合成酶基因表达量成正相关。3.创建了绿色薄荷基两相低共熔胶束体系,针对银杏叶中的黄酮苷、萜内酯和双黄酮类成分进行了提取富集研究,并探讨了新型溶剂的传质机制。FT-IR,~1H-NMR,NOESY及量子化学计算分析表明,合成溶剂主要由分子间氢键作用形成。确定了银杏叶资源活性成分的最佳提取工艺条件,薄荷醇:乙酸=1:1(mol/mol),DES:水=1:1(v/v),固液比为15:1(mg/m L),提取功率为200 W,提取时间为10分钟。两相溶剂体系可在提取后快速分离获得不同极性成分,同时可实现溶剂体系的回收再利用。该体系在提取时形成瞬时胶束增大了接触面积,促进了目标成分的有效提取。同时,通过量子化学计算分析,表明银杏双黄酮和低共熔溶剂之间存在氢键和范德华力等弱相互作用力,致使其更易分布于疏水的低共熔溶剂相。通过液相色谱制备了银杏叶资源中的4种双黄酮类成分,为后续的开发利用提供物质基础。4.基于分子动力学探讨了银杏叶活性成分在动脉粥样硬化防治中的功能并进行了初步活性验证。对银杏叶中黄酮醇苷、萜内酯和双黄酮类化合物进行了初步降脂筛选,银杏双黄酮可以明显抑制油酸诱导的Hep G2细胞脂质生成,降低总胆固醇和甘油三酯水平。采用反向找靶和分子动力学研究了双黄酮类化合物在动脉粥样硬化潜在靶点的非共价作用,银杏双黄酮与靶点CDK2通过Pi-Alkyl及氢键作用,增加了分子与蛋白的结合。银杏双黄酮使细胞停滞于G1-S期,致使细胞异常增殖受到明显抑制,表明银杏双黄酮对动脉粥样硬化发生和发展具有抑制作用。利用外源性Hep G2细胞模型评价了双黄酮类化合物与潜在靶点在细胞周期的相互作用。本文的研究成果超高效液相色谱串联质谱多反应监测方法、绿色薄荷基两相低共熔提取富集技术以及活性成分功能的预测和验证为银杏叶非木质资源的高值化利用提供了重要的科学依据,为森林资源提质增效和森林可持续经营提供了技术支撑。