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金针菇(Flammulina velutipes)又名毛柄金钱菌,隶属真菌门,担子菌亚门,层菌纲,伞菌目,膨瑚菌科,火焰菇属。金针菇含有十分丰富的营养物质,如维生素、蛋白质、氨基酸、脂质以及多糖等。多糖作为金针菇的重要活性物质之一,具有抗癌、抗衰老及调节免疫功能等多种生物活性。目前关于金针菇多糖的研究主要集中在水溶性多糖的提取、结构分析和生物活性方面,对碱溶性金针菇多糖的研究较少。为了深入了解金针菇中不同类型多糖的组成和结构,我们设计了本课题的研究内容,具体研究结果如下:以热水煮提后的金针菇子实体为实验原料,用0.5 M氢氧化钠溶液进行提取,提取液经透析除盐后冻干,得到碱溶性多糖AFVP,得率为1.48%(相对于湿重得率)。AFVP的总糖含量为89.3%,糖醛酸含量为0.9%,蛋白质含量为2.2%,灰分含量为4.73%。单糖组成分析表明AFVP主要由Glc(46.4%)和Man(29.7%)组成,此外还含有少量的Ara(11.5%)和Gal(9.7%)以及痕量Fuc(2.7%)。采用DEAE-Cellulose离子交换层析对AFVP进行分级,得到蒸馏水洗脱的中性糖级分AFVP-N和0.4 M NaCl洗脱的酸性糖AFVP-A。进一步采用凝胶柱层析SepharoseCL-6B和SephadexG-50对其进行纯化,得到3个均一级分AFVP-N-a,AFVP-N-b1和AFVP-A-b1。经单糖组成分析、分子量测定、红外光谱、甲基化分析及核磁共振分析证明,AFVP-N-a主要由Man和Gal构成,分子量为106 kDa,以α-1,3-Manp结构构成主链,在Manp残基的C-6位连有β构型的非还原末端Manp,此外α-1,6-Galp和α-1,4-Glcp也连接在主链上,构成复杂的葡半乳甘露聚糖结构(Glucogalactomannans)。AFVP-N-b1主要由Gal和Glc构成,此外含有少量Man和Fuc,其分子量为7.7 kDa,以α-1,6连接的Gal和β-1,6-Glc为主链,在部分Gal的O-2位发生取代,侧链以末端Man和末端Fuc的形式存在,为结构较为复杂的甘露葡半乳聚糖结构(Mannoglucogalactans)。而AFVP-A-b1主要由Glc构成,其分子量为3.1 kDa,还含有29.2%的蛋白质,推测其为蛋白聚糖结构,其中多糖部分以β-1,6-Glcp和部分α-1,6-Galp构成主链结构,在部分Glcp的O-3位连有t-β-Glcp侧链,还有少量Galp的O-2位连有t-α-Manp的侧链结构,推测AFVP-A-b1中的多糖为甘露半乳葡聚糖结构(Mannogalactoglucans)。