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目的:通过观察重型乙型肝炎恢复期患者肝组织中FGL2凝血酶原酶(Fibrinogen-like protein 2 prothrombinase)及HBVDNA的表达,并分析其FGL2凝血酶原酶的表达与患者肝脏病理变化、肝功能、凝血酶原活动度(PTA)、肝组织HBVDNA及血清HBVDNA的相关性,探讨FGL2凝血酶原酶在重型乙型肝炎发病机制及进展过程中的作用,进而了解FGL2凝血酶原酶表达测定的临床意义。方法:(1)根据重型肝炎诊断标准《2012年版肝衰竭诊治指南》和慢性乙型肝炎诊断标准《2015年版慢性乙型肝炎防治指南》,收集乙型肝炎患者57例,其中重型乙型肝炎恢复期患者38例为研究组(根据患者肝组织病理结果将无肝硬化的分为研究1组,有肝硬化为研究2组);慢性乙型肝炎患者19例为对照组(根据患者肝组织病理结果将轻度分为对照1组,中重度为对照2组)。(2)通过B超定位行肝脏穿刺活检术获取肝组织。行肝组织病理切片,HE染色,后做FGL2免疫组化制片。观察采集到的FGL2阳性表达强弱,即以细胞浆显现黄色、棕黄色、棕褐色染色为标准,选择每张切片上有代表性的高倍视野区域(×200),再以染色程度和阳性细胞面积来判断结果。(3)将石蜡切片的肝组织通过盐析法提取HBVDNA,采用实时荧光定量PCR法检测肝组织HBVDNA和血清HBVDNA的表达。(4)检测肝功能:主要为血清总胆红素(TBi L)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和门冬氨酸氨基转移酶(AST)的表达水平;检测凝血酶原活动度(PTA)的表达情况。(5)应用SPSS 17.0软件,对研究组与对照组,研究组之间分别进行两两对比统计分析肝组织中FGL2及HBVDNA的表达差异,并分析研究组FGL2的表达与患者肝脏病理变化、肝功能、PTA、肝组织HBVDNA及血清HBVDNA的相关性。结果:(1)研究组(重型乙型肝炎恢复期)肝组织相当于炎症分级(G)及纤维化分期(S)的病理特点为:无肝硬化的重型乙型肝炎恢复期组(研究1组)30例,G1 2例(6.67%),G2 2例(6.67%),G3 11例(36.66%),G4 15例(50%),S1 7例(23.33%),S2 3例(10%),S3 5例(16.67%),S4 15例(50%)。有肝硬化的重型乙型肝炎恢复期组(研究2组)8例:G2 3例(37.5%),G3 3例(37.5%),G4 2例(25%)。提示重型乙型肝炎恢复期肝组织相当于以G3-4S3-4为主,存在坏死后明显的肝纤维化,或存在坏死后的肝硬化,且肝组织炎症及纤维化同时表现。对照组(慢性乙型肝炎)经病理诊断为轻度10例(对照1组);中重度9例(对照2组)。(2)各组肝组织中FGL2表达的情况为:研究1组有29例(96.67%)阳性表达和1例(3.33%)阴性表达,其中阳性表达分别为:9例(30%)弱阳性,5例(16.67%)中度阳性,15例(50%)强阳性。研究2组和慢性中重度乙型肝炎组(对照2组)均有中强阳性表达。研究2组阳性表达分别为1例(12.5%)中度阳性,7例(87.5%)强阳性。对照2组阳性表达分别为5例(55.56%)中度阳性,4例(44.44%)强阳性。慢性轻度乙型肝炎组(对照1组)为阴性至弱阳性表达,其中有7例(70%)弱阳性表达和3例(30%)阴性表达。(3)肝组织中FGL2表达的平均分值情况为:研究组7.47±4.18,对照组4.11±4.51,经比较差异有统计学意义(P=0.007,P<0.01)。即研究组FGL2表达的平均分值高于对照组,说明重型乙型肝炎恢复期组肝组织中FGL2的表达强于慢性乙型肝炎组,提示重型乙型肝炎恢复期肝细胞炎症坏死程度高于慢性乙型肝炎。(4)各组肝组织中FGL2表达的平均分值分别为:6.47±4.03(研究1组),11.25±2.12(研究2组),0.80±0.63(对照1组),7.78±4.06(对照2组)。经检验F=18.065,组间比较,P<0.01,提示FGL2的表达在四组中存在显著差异。1)研究1组与研究2组比较,其差异有统计学意义(P=0.001,P<0.01)。即研究1组的平均分值低于研究2组,说明无肝硬化的重型乙型肝炎恢复期组肝组织中FGL2表达弱于有肝硬化的重型乙型肝炎恢复期组。提示无肝硬化的重型肝炎恢复期肝细胞炎症坏死程度低于有肝硬化的重型乙型肝炎恢复期。2)研究1组与对照1组比较,其差异有统计学意义(P<0.01)。即研究1组的平均分值高于对照1组,说明无肝硬化的重型乙型肝炎恢复期组肝组织中FGL2表达强于慢性轻度乙型肝炎组。提示无肝硬化的重型肝炎恢复期肝细胞炎症坏死程度高于慢性轻度乙型肝炎。3)研究1组与对照2组比较,其差异无统计学意义(P=0.191,P>0.05)。即研究1组的平均分值与对照2组相仿,说明无肝硬化的重型乙型肝炎恢复期组肝组织中FGL2表达与慢性中重度乙型肝炎组相似。提示无肝硬化的重型肝炎恢复期肝细胞炎症坏死程度与慢性中重度乙型肝炎相似。4)研究2组与对照1组比较,其差异有统计学意义(P<0.01)。即研究2组的平均分值高于对照1组,说明有肝硬化的重型乙型肝炎恢复期组肝组织中FGL2表达强于慢性轻度乙型肝炎组。提示有肝硬化的重型肝炎恢复期肝细胞炎症坏死程度高于慢性轻度乙型肝炎。5)研究2组与对照2组比较,其差异有统计学意义(P=0.021,P<0.05)。即研究2组的平均分值高于对照2组,说明有肝硬化的重型乙型肝炎恢复期组肝组织中FGL2表达强于慢性中重度乙型肝炎组。提示有肝硬化的重型肝炎恢复期肝细胞炎症坏死程度高于慢性中重度乙型肝炎。(5)肝组织中HBVDNA表达的平均值(lg copies/ml)情况为:研究组3.95±1.18,对照组4.79±1.49,经比较差异有统计学意义(P=0.041,P<0.05)。即研究组平均值低于对照组,说明重型乙型肝炎恢复期肝组织中HBVDNA的表达低于慢性乙型肝炎,提示重型乙型肝炎恢复期肝细胞HBV复制程度低于慢性乙型肝炎。(6)肝组织中HBVDNA表达的各组平均值(lg copies/ml)情况分别为:3.89±1.21(研究1组),4.18±1.07(研究2组),4.70±1.84(对照1组),4.88±1.08(对照2组)。研究1组分别与研究2组、对照1组、对照2组进行两两比较,研究2组分别与对照1组、对照2组进行两两比较,仅研究1组与对照2组比较差异有统计学意义(P=0.038,P<0.05)。即研究1组表达的平均值低于对照2组,说明无肝硬化的重型乙型肝炎恢复期组HBVDNA表达低于慢性中重度乙型肝炎组。提示无肝硬化的重型乙型肝炎恢复期肝细胞HBV复制程度低于慢性中重度乙型肝炎。其他组间比较经检验均无统计学意义(P>0.05)。(7)重型乙型肝炎恢复期肝组织中FGL2表达的平均分值与其恢复期的TBi L、ALT、AST、PTA、肝组织HBVDNA、血HBVDNA行Spearman相关分析,相关系数均无统计学意义(P>0.05)。结论:重型乙型肝炎恢复期肝组织相当于以G3-4S3-4为主,存在坏死后明显的肝纤维化,且肝组织炎症及纤维化同时表现,存在坏死后的肝硬化。肝组织中FGL2的表达重型乙型肝炎恢复期高于慢性乙型肝炎,其中无肝硬化的重型乙型肝炎恢复期低于有肝硬化的重型乙型肝炎恢复期,且与慢性中重度乙型肝炎相似;有肝硬化的重型乙型肝炎恢复期高于慢性中重度乙型肝炎;重型乙型肝炎恢复期高于慢性轻度乙型肝炎,说明肝组织中FGL2凝血酶原酶的表达并非为重型肝炎所特有的现象,FGL2在重型乙型肝炎恢复期为强表达,与病情存在坏死后的肝硬化正相关,且会随着重型乙型肝炎病情的好转而表达下降。肝组织HBVDNA在无肝硬化的重型乙型肝炎恢复期的表达低于慢性中重度乙型肝炎,提示重型乙型肝炎恢复期肝细胞HBV复制程度低于慢性中重度乙型肝炎。故而,人肝组织中FGL2凝血酶原酶的表达有望成为重型乙型肝炎病情发展过程中的一项监测指标,可间接反映肝细胞的炎症坏死或修复程度,为防治重型肝炎提供新的途径和方法。