应用Marc-145细胞扩增培养技术从福建省某猪场患繁殖障碍的猪血清中分离到一株病毒，经分析、鉴定证实该病毒为猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）并将其命名为PRRSV-FJ0601株。采用差速和蔗糖不连续密度梯度离心纯化的PRRSV福州株（PRRSV-FZ）病毒抗原免疫Balb／c小鼠，取其脾细胞与Sp2／0骨髓瘤细胞按常规方法进行融合，以间接ELISA筛选并经三次有限稀释法克隆，获得三株能稳定分泌抗PRRSV单克隆抗体的杂交瘤细胞株，分别命名为：McAb-A61、McAb-B47和McAb-C65。测定了单抗的生物学特性，制备了McAb-A61异硫氢酸荧光素标记物并用于检测PRRSV。获得如下结果：1、PRRSV-FJ0601株的分离与鉴定：从患繁殖障碍的发病猪血清中分离到一株病毒。该病毒能在Marc-145细胞上增殖并产生细胞病变（CPE），不能在PK-15、Vero上增殖；病毒对Marc-145细胞的致病变作用能被PRRSV阳性血清中和；间接免疫荧光试验证实分离毒能被PRRSV-FZ株单克隆抗体特异性识别；以分离毒核酸为模板，PRRSV保守序列为引物的RT-PCR能扩增出长443bp的特异性DNA片段。上述分析结果表明该分离毒为PRRSV。2、单抗的生物学特性：经分析、鉴定，McAb-A61、McAb-B47和McAb-C65抗体的亚级份分别为IgG₁、IgG₃和IgG₁亚类：细胞培养上清液和小鼠腹水抗体的ELISA效价分别为2⁶～2⁸和10⁵～10⁶；特异性分析结果表明三株单抗均能与PRRSV的FZ株、V2332株和FJ-1株等毒株反应，而不与Marc-145细胞、猪圆环病毒2型病毒和猪细小病毒发生交叉反应。Western-blot试验显示：三株单抗都与病毒蛋白中约26KD蛋白条带呈阳性反应，表明三株都是针对PRRSV GP5蛋白的单抗。间接免疫荧光试验（IFA）结果表明：McAb-A61和McAb-B47单抗能与PRRSV FZ株和V2332株反应，但不与FJ-1株反应；而McAb-C65则与三株供试的FZ株、V2332株和FJ-1株都能反应。IFA结果提示PRRSV的抗原表位可能存在空间分布上的差异，在有机溶剂作用下PRRSV-FJ-1株与McAb-A61和McAb-B47相对应的抗原位点产生构像变化，使其散失与单抗结合的能力。3、McAb-A61的荧光素标记与直接荧光方法的建立：采用饱和硫酸铵法纯化McAb-A61腹水抗体并与异硫氢酸荧光素（FITC）进行标记，制备出McAb-A61-FITC标记抗体。直接免疫荧光实验（IFA）结果表明：McAb-A61-FITC对感染PRRSV的Marc-145细胞呈现特异性的胞质荧光染色，与PRV、PCV2、PPV等病毒及正常Marc-145细胞均无交叉反应，具有良好的特异性。PRRSV单抗的成功制备与PRRSV直接免疫荧光检测方法的建立为深入研究PRRSV结构蛋白和临床快速诊断奠定了基础。