【摘 要】
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短暂的过高温刺激或长时间持续热应激,可引起机体体温调节及生理机能紊乱,严重时会出现器官衰竭,甚至猝死。肠道是维持肠道内环境平衡和阻碍致病菌及毒素的先天性屏障,热应激可破坏肠道屏障的完整性,引起脂多糖（LPS）或菌群泄露,进而引起全身炎症。十二指肠是肠道的起始段,是重要的消化吸收器官和免疫器官。前期研究表明,锦灯笼的多个活性成分呈现抗炎和抗氧化的活性。本研究通过体外和体内试验研究了锦灯笼对急性热应激
【基金项目】
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国家自然基金项目 （32002329）; 山东省自然科学基金（ZR2020QC194,ZR2020QC197,ZR202102180849）; 济南市高校 21 条资助项目 （2019GXRC025,2021GXRC120）; 山东省中央引导地方科技发展资金项目 （YDZX20203700003775）; 山东省科技型中小企业创新能力提升项目 （2021TSGC1275,2021TSGC1271）
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短暂的过高温刺激或长时间持续热应激,可引起机体体温调节及生理机能紊乱,严重时会出现器官衰竭,甚至猝死。肠道是维持肠道内环境平衡和阻碍致病菌及毒素的先天性屏障,热应激可破坏肠道屏障的完整性,引起脂多糖（LPS）或菌群泄露,进而引起全身炎症。十二指肠是肠道的起始段,是重要的消化吸收器官和免疫器官。前期研究表明,锦灯笼的多个活性成分呈现抗炎和抗氧化的活性。本研究通过体外和体内试验研究了锦灯笼对急性热应激致鸡十二指肠损伤的缓解作用,从抗氧化的角度结合损伤相关指标揭示了锦灯笼作为抗热应激药物的作用机制。为了研究热应激对十二指肠细胞的损伤作用及锦灯笼提取物对十二指肠细胞热损伤的缓解作用。本研究制备锦灯笼提取物,分离鸡胚十二指肠细胞,构建42°C热应激模型,检测了细胞活性、LDH含量、病理学损伤、氧化应激相关指标和氧化损伤相关基因表达等指标。试验结果表明:（1）热应激可导致细胞活性降低、LDH升高。（2）热应激可导致MDA含量升高、抗氧化酶SOD和CAT活性降低。（3）热应激可导致细胞空泡变性等病理性损伤。（4）100μg/m L的锦灯笼提取物可有效缓解十二指肠细胞热应激损伤,在热应激5 h时,可显著抑制热应激诱导的LDH和MDA水平升高,极显著提高抗氧化酶SOD和CAT的活性。（5）100μg/m L的锦灯笼提取物在热应激5 h和10 h时可显著上调氧化损伤相关基因NQO1、HO-1和Hsp70的转录水平。为了进一步明确锦灯笼提取物对急性热应激致鸡十二指肠组织损伤的保护作用,本课题将90只海兰褐鸡随机分为三组:对照组、锦灯笼（1 g/kg/d）组和锦灯笼（3g/kg/d）组。锦灯笼提取物通过饮水给药,在40±1°C热应激环境下分别热应激0 h、6 h和12 h,测定鸡只体温、皮质醇水平、氧化损伤指标和十二指肠绒隐比值。试验结果表明:（1）添加锦灯笼提取物可抑制热应激引起的鸡只体温升高。（2）添加锦灯笼提取物可显著上调鸡血清中皮质醇含量,增强鸡的抗应激能力。（3）对十二指肠HE染色后测定小肠绒毛长度和隐窝深度,发现锦灯笼提取物可显著上调十二指肠绒/隐比值,增强鸡的消化能力。（4）检测氧化应激相关指标,发现锦灯笼提取物可显著下调血清中MDA水平,提高抗氧化酶SOD和GSH-PX的活性。综上所述,热应激可导致十二指肠细胞的氧化损伤。细胞中添加100μg/m L锦灯笼提取物,或者在饮水中给鸡添加1 g/kg/d和3 g/kg/d的锦灯笼提取物,可在体外、体内水平缓解热应激导致的细胞损伤,其机制可能与增强细胞内抗氧化酶活性和上调氧化损伤相关基因NQO1、HO-1和Hsp70的转录水平有关。本研究为锦灯笼提取物作为抗热应激药物的应用前景提供了理论基础。
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