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第一部分纯钛表面纳米浅凹结构的构建目的：探究在纯钛表面构建不同直径TiNF (Titanium dioxide Nano-foveolae,二氧化钛纳米微凹)的方法,研究不同的实验参数对TiNF形态的影响规律。方法：首先将成品钛片进行分割,然后利用阳极氧化装置,将切好的钛片在不同的条件下进行阳极氧化处理。其控制条件主要包括作用时间、电解液以及电压的不同,其中电压为主要的控制因素。根据电解时电压的不同分成5组,每组3个试件,分别是5V、25V、40V.60V组和对照组(Ctrl组),其中5V与25V组的电解液为无机混合酸溶液,40V、60V组的电解液为有机混合酸溶液,对照组的钛片不做氧化处理,最后利用扫描电子显微镜(SEM)及原子力显微镜(AFM)观察各组钛片的表面形形貌并计算表面粗糙度。结果：(1)阳极氧化处理得到的TiNF直径与电压的大小成正比；(2)电压控制在5V、25V时,电解液为无机混合酸,所得纳米凹陷的直径约为40nn、 80nm;电解电压控制在40V、60V时,电解液为有机混合酸,其表面的TiNF直径为100Onm、120nm左右。(3)试验各组中有机电解液形成的TiNF结构相对较为清晰,但无机电解液形成的TiNF结构边界不清。结论：(1)利用阳极氧化技术对纯钛表面改性时,通过调节电解电压的大小,可以改变氧化膜TiNF的直径,且电压的大小与TiNF的直径呈正比；(2)有机电解液所形成的TiNF的边界较无机电解液清晰；(3)在实验各组中,电解电压控制为5V和40V时,所得的TiNF形态结构较稳定。第二部分探究人牙龈成纤维细胞在纳米浅凹表面的附着影响目的：选择形态较为稳定的TiNF组别(5V、40V组),将获得的TiNF结构与人牙龈成纤维细胞共培养,研究该材料对细胞行为的影响,为一种新的种植体颈部表面处理方式提供实验依据。方法：实验分为3组,每组3个试件,分别是形态较为规则稳定的5V、40V组的钛片及未处理的光滑钛片,记为记为5V组、40V组、Ctrl组。将3组钛片放入双蒸水内,超声清洗3 min,以除去表面杂质,然后常规高压蒸汽灭菌,70℃下烘干、备用。选取生长状态良好的第4代人牙龈成纤维细胞分别于不同组别的钛片共培养,每组设置3个副孔,分别培养2小时、8小时、1天、2天。检测手段为分别通过活/死细胞染色进行初期粘附细胞计数并观察细胞的伸展状态；利用MTT计数检测共培养初期成纤维细胞的增值情况及细胞毒性的检测；通过ELISA检测细胞外基质中主要的粘附蛋白：FN-1的表达量；基因水平的探究则利用RT-PCR技术检测细胞外基质中VCL(Vinculin)及COL1-a1 (Collagen type I-alpha1)的表达变化。结果：(1)活／死细胞染色及MTT结果可见：人牙龈成纤维细胞在附着数量及细胞增殖情况在40V组最佳,且随着培养时间的延长,细胞逐渐得到完全伸展并伸出伪足。(2) ELISA及RT-PCR检测可见40V组的钛片表面的粘附蛋白FN-1及主要的细胞外基质组成部分VCL、COL1-a1的表达量与5V组相比均有统计学意义(P<0.05),且表达变化呈现时间依赖性。结论：当钛片表面TiNF的直径为100nm左右,即阳极氧化处理时的电压控制在40V时,人牙龈成纤维细胞对TiNF结构的初期附着性能最佳,并且这种结构对于细胞粘附性能影响也呈时间依赖性。