Let-7c-5p在乳腺癌中的表达、功能及其分子机制的研究

来源 :浙江理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liuyi8431201
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
乳腺癌是女性最普遍的恶性疾病之一,它的高发生率及死亡率严重威胁女性身心健康。随着精准医疗的提出,乳腺癌的治疗方法将更加多样化,治疗效果也将更加令人满意。在精准医疗中基因工程将发挥重要作用,所以探究基因在乳腺癌中扮演的角色以及其发挥作用的分子机制能够为精准医疗奠定理论基础。Let-7c-5p是抑癌基因let-7家族中的一员,它在前列腺癌、非小细胞肺癌以及结肠癌中都起着一定的抑癌作用,在乳腺癌患者血清中检测到其表达量呈明显下降趋势,但是let-7c-5p在乳腺癌中的生物学功能尚未明了。本研究选取9对乳腺癌以及相对应癌旁组织的石蜡包埋样本为实验对象,提取其总RNA后,进行RT-qPCR检测let-7c-5p在乳腺癌及癌旁组织中的表达情况;同时在乳腺癌细胞MCF-7中过表达let-7c-5p,采用MTT的方法测试let-7c-5p对MCF-7细胞增殖能力的影响,利用流式细胞仪探测let-7c-5p对MCF-7细胞凋亡的影响;然后利用生物信息学软件预测let-7c-5p潜在的靶标基因,并用双荧光素酶实验加以验证,再采用荧光定量PCR和Western blotting实验深入探索其调控方式。结果显示let-7c-5p在9例乳腺癌组织中的表达量均低于对应的癌旁组织,其在癌组织中的表达量约为癌旁组织的0.23。对乳腺癌细胞MCF-7转染let-7c-5p mimics后,细胞中let-7c-5p表达量较对照组显著升高(P<0.01),转染后细胞的增殖能力受到明显抑制(P<0.01),且抑制效果与let-7c-5p mimics终浓度呈正相关;流式细胞仪检测结果表明过表达let-7c-5p后细胞凋亡率明显上升(P<0.01)。生物信息学软件预测ERCC6为let-7c-5p潜在的靶标基因,双荧光素酶实验、Western blotting和荧光定量PCR结果表明let-7c-5p能够结合至ERCC6 mRNA的3’UTR,从而抑制ERCC6蛋白的合成,但是ERCC6 mRNA的表达水平并不受let-7c-5p影响。综上,本研究结果表明let-7c-5p在乳腺癌组织中呈低表达,在乳腺癌细胞中过表达let-7c-5p能明显抑制细胞增殖,并且引发细胞凋亡,ERCC6为let-7c-5p的靶基因,let-7c-5p可能通过抑制ERCC6蛋白表达发挥其抑癌作用。
其他文献
目的调查广西城乡居民主要食物消费状况,为居民合理调整膳食结构提供依据。方法用多阶段分层整群抽样法,对6个慢性病监测点常住居民开展调查,按中国居民平衡膳食宝塔(CBDP)评
目的:探讨白芍总苷对糜烂型口腔扁平苔藓患者外周血中IFN-γ及IL-10表达的影响。方法:选取于2014年2月~2015年3月我院皮肤科与口腔科收治的38例糜烂型口腔扁平苔藓患者为研究对
目的分析预防接种疑似异常反应(AEFI)的发生特征,评价AEFI信息管理系统运行状况和疫苗免疫的安全性。方法用描述性流行病学方法分析2012年度龙岩市疑似预防接种异常反应信息
在交联聚乙烯(XLPE)电力电缆的局部放电模式识别的研究中,为解决标注样本数量过少而导致识别率低下的问题,引入基于半监督学习的方法进行电缆局部放电模式识别研究。制作了XLPE
葡萄树是一种典型的喜钾果树,素有“钾质植物”之称,钾能提高葡萄纤维素含量,增强抗寒能力,同时可促进浆果成熟,有利于养分向浆果转移,使糖分含量增加。根据葡萄树的生育特性和需肥
学位
以苹果内生枯草芽孢杆菌BS10为试验菌株进行发酵培养基的优化,通过单因素试验选出最佳的碳源和氮源,通过正交试验筛选出最佳C/N比,对pH值、发酵温度和接种量进行了研究。结果表明
针对新课改后原有教学理念与教学模式面临的新挑战,指出教师要不断改革教学手段,不仅要重视课堂教学,更要重视学生课后作业的完成情况,帮助学生培养学习物理的兴趣,掌握好基
本文介绍了快速响应旋转型喷头自动喷水灭火系统的设计,建立了经国家消防装备质量监督检验中心检验合格的专利喷头流量公式,阐述了配水支干管水力计算参数等技术,可供大中小
本文主要以高校图书馆的创新——细节管理为重点进行阐述,结合当下图书管理创新面临的困难和问题为主要依据,从创新管理理念、创新管理制度、创新管理方式这几方面进行深入探
2009年,国内钢材价格大体呈现“W”形走势。2010年,国内外需求增长,但国内钢铁行业仍然面临产能过剩、库存积压、生产成本增加以及贸易保护主义等多重压力。加快调整产业结构