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目的:观察胱天蛋白酶募集域蛋白9(CARD9)在急性中重度缺血性脑卒中发病早期阶段的作用;探讨脑卒中炎症发病机制。方法:收集36例急性中重度缺血性脑卒中患者发病第1、3、7天外周静脉血;入选20名健康志愿者做为对照组,入组同时收集外周静脉血。使用密度梯度法离心分离PBMC;Western blot检测单核细胞内CARD9表达水平及NF-kB亚基活性(p-p65/p65水平);RT-PCR检测单核细胞内炎症因子TNF-ɑ、IL-lβ、IL-6 mRNA的表达水平;病例组第1、3、7天使用NIHSS评分评估脑缺血损伤程度;结果使用SPSS 23进行分析。结果:Western blot结果表明缺血性脑卒中患者外周血单核细胞中CARD9表达增加,与正常对照组(0.34±0.02)相比,病例组第1、3、7天(1.17±0.14、1.08±0.15、0.97±0.16)明显升高,有显著统计学差异(p(27)0.01);病例组内比较第1天CARD9表达迅速达到峰值,第3、7天逐渐下降,两两比较下降具有显著差异(p(27)0.01);NF-kB活性使用p-p65/p65亚基活性表示,与正常对照组(1.21±0.12)比较,病例组第1、3、7天(1.78±0.06、1.70±0.07、1.46±0.04)升高,第1、3天差异具有显著统计学意义(p(27)0.01);第7天差异具有统计学意义(p(27)0.01),病例组内比较第1天p-p65表达达到峰值,第3、7天逐渐下降,两两比较下降趋势具有显著差异(p(27)0.01)。RT-PCR结果表明,与对照组(1.00±0.08)相比,病例组TNF-amRNA第1、3、7天(5.34±0.14、4.57±0.15、3.58±0.19)增高,差异具有显著统计学意义(p(27)0.01)。通过单因素重复测量方差分析,第1、3、7天TNF-amRNA表达呈下降趋势,两两比较具有显著差异(p(27)0.05),病例组IL-1bmRNA表达与对照组(1.00±0.11)相比,第1、3、7天(6.49±0.12、4.85±0.23、3.38±0.31)表达增高,差异具有显著统计学意义(p(27)0.01),且随时间呈下降趋势,两两比较具有显著差异(p(27)0.05);病例组IL-6 mRNA也随时间呈下降趋势(p(27)0.05),与对照组(1.00±0.07)相比,第1、3、7天(10.29±0.55、7.32±0.44、4.56±0.33)明显增高,差异具有显著统计学意义(p(27)0.01)。且随时间呈下降趋势,两两比较具有显著差异(p(27)0.05)。Pearson相关分析表明:脑卒中患者PBMC中NF-kB亚基活化、TNF-ɑ、IL-lβ、IL-6 mRNA、及NIHSS评分大小与CARD9表达呈正相关(r=0.971、0.974、0.970、0.982、r=0.891,p(27)0.01)。结论:1.缺血性脑卒中发病后CARD9蛋白表达及NF-kB活性增加,第1天达到峰值,之后随时间逐渐下降。2.缺血性脑卒中发病后炎症因子TNF-a、IL-1b、IL-6表达增加,第1天达到峰值,之后随时间逐渐下降。3.中重度缺血性脑卒中后NIHSS评分明显升高,且随治疗进展无明显升降。4.CARD9与NF-kB及炎症因子TNF-a、IL-lb、IL-6呈正相关,结合前期基础实验,推测CARD9在中重度缺血性脑卒中疾病早期激活NF-kB信号通路诱导炎症因子的产生,从而参与脑损伤发生