大肠杆菌是引起奶牛乳腺炎的重要病原菌,近年来因该菌感染引起的奶牛乳腺炎发病率呈上升趋势。此外,由于治疗过程中抗生素的不规范使用,造成奶牛乳腺炎大肠杆菌的耐药性问题突出,亟需开展对该菌的防控研究。新疆南疆地区是重要的奶牛养殖地区,为进一步了解该地区奶牛乳腺炎源大肠杆菌的流行特点、耐药性及探寻可能的防控方法,本研究开展如下研究:1.南疆地区奶牛乳腺炎源大肠杆菌的分离、鉴定及耐药性监测为了解新疆南疆奶牛乳腺炎大肠杆菌的分子流行病学,本研究通过对2019-2021年该地区四个奶牛养殖场采集到的样本进行分离鉴定,并对分离的126株乳腺炎大肠杆菌进行药敏试验和系统发育群研究,结果表明该地区奶牛乳腺炎大肠杆菌的分离率为40.5%。对分离菌株的药敏试验结果表明,分离株对抗生素的耐药率分别为:四环素（42.9%）、链霉素（34.5%）、头孢拉定（30.3%）、复方新诺明（28.6%）、氨苄西林（26.9%）、庆大霉素（21%）;分离菌株对阿莫西林克拉维酸钾、多粘菌素B敏感;对分离菌株的多重耐药性分析结果表明,约有1/3的耐药菌株显示为多重耐药菌株（MDR）。对分离菌株的系统发育群试验结果表明,分离菌株以共生性群落A、B1群为主占总分离株的85.8%,系统发育群D群B2群分别为11.1%和3.2%。2.南疆地区奶牛乳腺炎源大肠杆菌耐药基因与ESBL（超广谱β-酰胺酶）的检测为了对分离菌株开展耐药基因检测,本研究选择11种耐药基因（CTXM、Amp C、tet A、TEM、SHV、KCP、tet B、acr A、acr B、OXA、tet-C）,通过条件优化,建立3个三重PCR和1个双重PCR检测方法。运用建立的耐药基因PCR检测方法,对分离的126株乳腺炎大肠杆菌进行耐药基因检测,检测结果表明,Amp C、TEM、acr A检出率最高分别为99.2%、99.2%和92.9%,其次为acr B的72%,tet A、tet B四环素耐药基因检出率均为18.3%,所有分离株中SHV、KCP、OXA和tet-C均未检测到。对全部10株CTX-M和15株TEM+Amp C乳腺炎大肠杆菌进行酶抑制剂增强试验,结果表明CTX-M与ESBL呈现强相关性,而TEM和Amp C的组合并未检出阳性即不产生超广谱β-内酰胺酶。对全部10株CTX-M和15株TEM+Amp C乳腺炎大肠杆菌进行生物被膜试验,其结果表明ESBL酶抑制剂增强试验阳性菌株相较于阴性菌株有着更强的生物被膜形成能力。3.基于益生菌和衣康酸开展奶牛乳腺炎源大肠杆菌防控技术研究为了筛选可用于奶牛乳腺炎源大肠杆菌防控的产品,本研究分离获得地衣芽孢杆菌、副地衣芽孢杆菌、布氏乳酸菌、瘤胃乳酸菌、枯草芽孢杆菌、魏斯氏乳酸杆菌六株益生菌,验证其裂解产物和上清对分离菌株的抑制作用。结果表明,6株益生菌的裂解液与上清对乳腺炎大肠杆菌无显著抑制作用。衣康酸及其衍生物在抗菌、抗炎、抗肿瘤等方面都重要作用,为了验证衣康酸在防控奶牛乳腺炎源大肠杆菌中与耐药性最高的四环素是否具有协同作用,本研究分别选择不同浓度的衣康酸与四环素联合使用,验证其对分离株的抑菌效果,结果表明75 mmol/L、50 mmol/L、25 mmol/L的衣康酸单独使用时对乳腺炎源大肠杆菌的无抑制作用,但75 mmol/L、25 mmol/L的衣康酸与25 mg/m L的四环素联合使用,具有协同作用,其可显著抑制乳腺炎源大肠杆菌。本研究结果表明,新疆南疆地区奶牛乳腺炎源大肠杆菌分离率为40.5%,分离菌株的多重耐药率高,耐药基因Amp C、TEM和acr A检出率高,CTX-M与ESBL呈现强相关性,且ESBL菌株有着更强的生物被膜形成能力。衣康酸与四环素的联合使用可有效提高对分离菌株的抑制作用,本研究可为新疆南疆地区奶牛乳腺源大肠杆菌的防控提供参考。