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本文对木兰科几种植物的种子休眠、萌发、贮藏习性和贮藏条件,以及离体培养和离体保存进行了研究,初步判断出川滇木莲、西康玉兰、灰岩含笑、黄兰、球花含笑和云南含笑等6种木兰科植物种子休眠类型、打破休眠方法、贮藏习性和适宜贮藏条件,对望春玉兰、馨香玉兰、黄兰、乐昌含笑、多花含笑和球花含笑进行了离体培养和离体保存的研究,建立了离体保存体系。
1.木兰科6种植物种子的休眠类型
研究结果表明黄兰种子属形态休眠,GA可促进其种子萌发。川滇木莲、云南含笑、灰岩含笑和球花含笑为中度复杂型形态生理休眠,由于后熟作用可打破这4种植物种子休眠,冷层积和GA都可克服种子休眠,4种植物种子形态生理休眠中生理休眠类型可能属于非深度生理休眠。西康玉兰种子也属于中度复杂型形态生理休眠,然而后熟作用不能打破西康玉兰种子休眠,但可缩短冷层积所需时间,其中的生理休眠可能属于中度生理休眠。
研究还发现川滇木莲和云南含笑种子在冷层积过程中很可能存在种子休眠循环现象,这在中度复杂型形态生理休眠种子中尚属首次发现。
2.木兰科6种植物种子休眠解除方法
在打破木兰科6种植物种子休眠促进其萌发的方法中,冷层积和GA浸泡方法均非常有效,但冷层积时间的长短因种而异,暖层积对种子休眠的作用甚微或根本无作用。流水冲洗和短期冷浸对川滇木莲、西康玉兰、云南含笑和灰岩含笑种子打破休眠没有作用,但可打破球花含笑种子休眠。硝酸钾仅对休眠程度非常浅的球花含笑种子有作用,可完全打破种子休眠。
干藏在4℃下,后熟作用可打破川滇木莲、灰岩含笑、球花含笑和云南含笑的种子休眠,而西康玉兰后熟100d并未打破种子休眠。
3.木兰科6种植物种子的贮藏习性和适宜贮藏条件
通过对川滇木莲、西康玉兰、灰岩含笑、黄兰、球花含笑和云南含笑种子进行不同脱水时间干燥后,测定其耐干性及分别贮藏于4℃和-20℃环境下2-3个月后萌发率,根据判断种子贮藏习性的程序,对此6种木兰科植物种子进行种子贮藏习性的判断。川滇木莲、云南含笑种子可能为中间型种子,在-20℃下部分种子可保持生活力;西康玉兰可能为不耐零下低温的中间型种子,在-20℃下种子全部失活。灰岩含笑、黄兰和球花含笑可能为可忍耐零上低温的低度顽拗型种子。由研究结果可知,木兰科6种植物种子均可忍耐零上低温,在4℃下贮藏2-3个月后,种子活力下降很少。因此,川滇木莲、西康玉兰、云南含笑、球花含笑、灰岩含笑和黄兰种子贮藏均适宜在4℃环境条件下,顽拗型种子(灰岩含笑、黄兰和球花含笑)可直接将新鲜种子密封贮藏于4℃下,中间型种子(川滇木莲、西康玉兰和云南含笑)可进行适度干燥(10%-15%)或直接密封贮藏于4℃下;低温(4℃)保湿贮藏法可有效保持种子生活力,且同时可进行层积作用打破种子休眠,促进种子萌发。
4.木兰科6种植物的离体培养和离体保存
本文采用木兰科望春玉兰、馨香玉兰、黄兰、乐昌含笑、多花含笑和球花含笑6种植物幼嫩的种子萌发苗作为外植体,诱导腋芽萌发生长,进行增殖及离体保存实验。通过对这6种植物的离体培养发现,低浓度的生长调节剂对芽苗的生长和增殖更为适宜;抗氧化剂抗坏血酸可缓和褐化作用的程度。由于外植体材料非常幼嫩,芽的诱导和增殖过程并不困难,但培养过程中,玻璃化、褐化及破碎愈伤组织的产生仍旧是木兰科植物离体培养存在的主要问题。
本研究选用三种不加激素的培养基对木兰科6种植物进行离体保存,加入活性炭可有效防止褐化,植株在三种培养基中生长缓慢但生长健壮,可有效保存半年甚至一年以上。
综上所述,黄兰是具形态休眠的低度顽拗型种子,灰岩含笑和球花含笑是具中度复杂型形态生理休眠的低度顽拗型种子,西康玉兰、川滇木莲和云南含笑为具中度复杂型形态生理休眠的中间型种子。保存木兰科种质资源的有效方法是采用低温干藏或低温保湿贮藏种子;在采用幼嫩外植体进行离体培养的情况下,加入活性碳的无激素培养基可有效保存木兰科植物的离体种质资源。