由于创伤、退行性疾病、肿瘤、感染和手术导致的大段骨缺损治疗是临床面临的巨大挑战。自体骨移植与异体骨移植存在诸多问题限制其在临床上的广泛应用。组织工程学为骨缺损修复重建提供了新的思路。组织工程通常包含细胞、生长因子以及材料支架,这中间重要的一个组分就是具有多分化潜能的种子细胞。骨髓间充质干细胞（BMSCs）作为一种理想的骨组织工程移植细胞经常被应用到骨缺损治疗之中。提高BMSCs的成骨分化能力将更好的刺激新骨的生成。长链非编码RNA（lnc RNA）在细胞代谢调节中起着重要的作用,然而绝大多数lnc RNA在BMSCs成骨分化中的作用并不了解。本研究通过高通量测序手段筛选了在m BMSCs成骨分化中高表达的lnc RNA作为研究对象,并系统的研究了目标lnc RNA在成骨分化中的调控作用,为更快更好的促进骨生成提供了新思路。主要研究内容如下:（1）m BMSCs成骨分化过程中差异表达lnc RNA的筛选。本研究首先对m BMSCs进行成骨分化诱导,诱导的m BMSCs产生了更多的矿化结节、碱性磷酸酶,成骨相关基因表达量提高,表明m BMSCs成骨分化诱导成功。再将成骨分化诱导14天的m BMSCs的RNA样本进行高通量测序,筛选m BMSCs成骨分化过程中差异表达的lnc RNA。有1933个lnc RNA表达水平存在差异,其中有1260个基因上调,有673个基因下调。选择其中的Gm16263、Gm35782、Lncpint作为初始研究对象,运用过表达真核载体过表达这3个lnc RNA以探究它们对成骨分化的影响。其中过表达Gm16263显著促进了成骨基因OPN、OCN、Runx2、ALP、Col-I的表达,而过表达Gm35782、Lncpint对于成骨相关基因表达影响趋势不明显。（2）Gm16263对于成骨分化调控作用研究。经过筛选后,确认了以Gm16263作为研究对象。Gm16263在成骨分化第7天表达量更高,定位于细胞质发挥作用。持续过表达Gm16263的情况下,第7天和第14天都分泌了更多的矿化结节与碱性磷酸酶,成骨相关蛋白Col-I和Runx2表达水平升高。第7天时,成骨相关基因OPN、ALP、Col-I、Runx2的表达水平显著提高,其中成骨早期标志性酶ALP基因的表达水平提高了约9.4倍。第14天时,成骨相关基因OPN、OCN、Runx2的表达水平显著提高,其中成骨分化后期标志性蛋白OCN基因的表达水平提高了约2.3倍。敲低Gm16263表达的情况下,成骨相关基因Runx2、ALP、Col-I、Osx的表达水平显著降低,成骨相关蛋白Col-I和Runx2表达水平降低。再根据高通量测序结果中的靶基因预测结果,分析Gm16263对于靶基因的影响。过表达Gm16263的情况下,Taok3的基因表达水平显著提高,同时Taok3蛋白表达水平升高。敲低Gm16263表达的情况下,Taok3的基因表达水平显著降低,同时Taok3蛋白表达水平降低。Gm16263可以通过促进Taok3的表达促进m BMSCs成骨分化。（3）包裹过表达Gm16263 m BMSCs的F127对骨生成作用的研究。选择F127作为包裹细胞的载体,F127是可注射的,具有可逆的凝胶化机制,具有良好的生物相容性。使用小鼠颅骨4.4mm临界缺损动物模型评价Gm16263在体内促成骨能力,包裹过表达Gm16263 m BMSCs的F127组生成了更多的新骨。本研究通过高通量测序筛选出m BMSCs成骨分化过程中高表达的Gm16263,Gm16263可通过促进Taok3的表达促进m BMSCs成骨分化,Gm16263应用于骨缺损修复中促进了骨生成,有望为骨缺损修复提供新思路。