论文部分内容阅读
目的:采用HepG2 2.2.15细胞系,探讨苦豆子不同提取部位,以及其所含苦参碱类化合物单用和联用拉米夫定抑制乙肝病毒复制的作用,考察时效、量效和构效关系,筛选苦豆子中协同拉米夫定抗乙肝病毒的增效成分。方法:选用对数生长期的HepG2 2.2.15细胞,受试药物分别为各浓度的苦豆子乙醇总提取物、氯仿提取物、正丁醇提取物和乙酸乙酯提取物;槐果碱、氧化槐果碱和槐定碱;苦参碱和拉米夫定联用、氧化苦参碱和拉米夫定联用;拉米夫定为阳性对照药。分别作用3天、6天和9天后,取培养液上清,检测HBsAg和HBeAg和HBV DNA的表达量。结果:1、苦豆子不同提取部位对HepG2 2.2.15细胞表达HBsAg、HBeAg和HBV DNA均有较强的的抑制作用,其中乙酸乙酯部位抑制作用最强,86%,各部位抑制作用顺序:乙酸乙酯提取部位>乙醇提取部位>水提部位>氯仿提取部位>正丁醇提取部位。2、苦豆子所含苦参碱类化合物对HepG2 2.2.15细胞表达HBsAg和HBeAg均有抑制作用,其中槐果碱抑制作用最强,92为%,各成分抑制作用顺序:槐果碱>槐定碱>氧化槐果碱>。2、苦参碱联合拉米夫定、氧化苦参碱联合拉米夫定对HBsAg和HBeAg的最大抑制作用分别是其单用时的6.8倍、12.6倍、1.9倍和2.8 倍。3、由苦参碱和氧化苦参碱对比;槐果碱和氧化槐果碱对比可知,随着极性的增大,药物对HBeAg的抑制作用较强,而随着极性的减小,药物对HBsAg的抑制作用较强。结论:由本课题研究结果可以初步判断苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱、氧化槐果碱和槐定碱均为抗乙肝病毒的药效物质。苦豆子中主要成分苦参碱和氧化苦参碱分别联用拉米夫定与两者单用相比可明显增强抗原HBsAg和HBeAg的表达。这为临床抗乙肝病毒的研究提供了参考同时也为下一步开发苦豆子抗乙肝病毒类药物奠定了 一定基础。