骨化三醇对周围神经损伤后大鼠脊髓运动神经元的保护作用

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目的:坐骨神经损伤后会导致脊髓前角运动神经元凋亡,这将严重影响神经再生和神经功能的恢复。近年来有许多研究显示,多种神经营养因子可以减少坐骨神经损伤导致的脊髓前角运动神经元的凋亡,然而这些神经营养因子存在价格昂贵,局部给药浓度难以维持等缺点。有研究显示,维生素D除具有调节钙磷调节的作用外,还对神经系统具有重要作用,它可通过促进神经营养因子的生成产生神经营养作用,并具有一定的神经保护作用。然而,维生素D的神经营养作用和神经保护作用目前主要集中在对脑神经元的研究,维生素D是否对脊髓运动神经元也有保护作用,尚未见报道。因此设计本实验以探讨骨化三醇(1,25(OH)2D3)对周围神经损伤后脊髓前角运动神经元的保护作用。方法:48只SD大鼠随机分为对照组和骨化三醇(1,25(OH)2D3)组,每组24只,切断右侧坐骨神经,近端结扎,远端埋入股二头肌,制作坐骨神经损伤模型。术后骨化三醇组给予骨化三醇2μg·kg-1·d-1灌胃,对照组给予脂肪乳剂2ml·kg-1·d-1灌胃。灌胃7天。术后1、2、4周分别处死动物,经心灌注固定,取腰膨大(L4-L6节段)脊髓,分别行尼氏染色,胆碱酯酶(CHE)染色和酸性磷酸酶(ACP)染色,并结合计算机进行图像分析。结果:术后1、2、4周骨化三醇组脊髓前角运动神经元存活率分别为(90.83±3.52)%、(84.14±2.30)%和(76.15±2.72)%,对照组脊髓前角运动神经元存活率分别为:(84.31±6.52)%、(76.30±2.74)%和(73.4±1.91)%,各时间点骨化三醇组脊髓前角运动神经元存活率均高于对照组,差异有统计学意义P<0.05;骨化三醇组脊髓CHE染色阳性面积百分率分别为(69.11±1.38)%、(74.45±3.39)%、(78.86±6.58)%,高于对照组(59.48±1.03)%、(65.79±3.97)%(66.78±5.32)%,差异有统计学意义,P<0.05;骨化三醇组脊髓ACP染色阳性面积百分率分别为(182.78±5.51)%、(115.04±12.53)%、(108.7±8.36)%,低于对照组(206.53±14.71)%、(138.21±9.85)%、(115.06±8.96)%,第1、2周差异有统计学意义P<0.01,第4周差异无统计学意义,P>0.05。结论:(1)周围神经损伤后,脊髓运动神经元发生退变,脊髓前角运动神经元数量减少,神经元内胆碱酯酶含量减少,酸性磷酸酶含量增多;(2)骨化三醇能减少周围神经损伤所致的脊髓前角运动神经元死亡,缓解运动神经元内胆碱酯酶(CHE)含量降低,并减轻周围神经损伤所致的运动神经元内酸性磷酸酶(ACP)含量的增高;(3)骨化三醇对周围神经损伤所致的脊髓前角运动神经元损伤有保护作用。
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