金针菇工厂化栽培环境调查与金针菇绵腐病的生物防治

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金针菇工厂化栽培过程中,环境卫生情况对金针菇的生产具有重要的影响。本文采用平皿沉降法测定洁净区域的空气中浮游微生物的含量,并参照医药行业的洁净度等级标准,对洁净区域环境洁净度和微生物群落变化进行分析。结果表明:在检测期间,金针菇工厂化栽培各净化区域(冷却室、接种室、培养室)洁净程度均较高。此外,发现霉菌数量与生产污染率具有相关性,在霉菌数量达到最大值时,污染率也达到最高值,因而需降温、除尘、消毒等方式降低霉菌数量,以减少污染率。在金针菇的栽培过程中发现,有一种绵腐病真菌对金针菇的生产具有很大的危害,工厂里称其为白霉。经分离纯化、形态学及ITS序列分析,该菌为异形葡枝霉(Cladobotryum varium)食用菌生产中对异形葡枝霉的防治以化学药物防治为主,本文从生物防治角度出发,用平板对峙法筛选出1株对异形葡枝霉有强拮抗作用的细菌,将其命名为B43-1。通过形态特征的观察、生理生化实验、16SrDNA及gyrA基因测序分析,鉴定结果表明菌株B43-1为解淀粉芽孢杆菌。解淀粉芽孢杆菌产生的脂肽类抗生素有表面活性素、伊枯草菌素和芬枯草菌素。实验发现解淀粉芽孢杆菌B43-1的发酵上清液对异形葡枝霉具有抑制作用。通过酸沉淀、甲醇抽提、硅胶柱层析、HPLC分离纯化和质谱分析鉴定,并结合特异基因ituC的测序分析,初步确定解淀粉芽孢杆菌B43-1抑制异形葡枝霉的主要脂肽类抗生素为伊枯草菌素C(iturin C)。6种化学杀菌剂药效实验表明,甲霜灵·锰锌、甲基托布津、代森锰锌和福美双对异形葡枝霉的抑制效果最好,但甲霜灵·锰锌、代森锰锌和福美双对金针菇菌丝的毒性大,而甲基托布津对金针菇菌丝几乎没有毒性。由于解淀粉芽孢杆菌B43-1发酵上清液粗提取物能有效抑制异形葡枝霉生长,通过其与甲基托布津的混配的实验发现,其能在减少甲基托布津的浓度下,还能提高对异形葡枝霉生长的抑制作用。
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