【摘 要】
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目的 研究重组人白细胞介素13（Recombinant human interleukin 13，rhIL-13）诱导白血病细胞系Dami和HEL（human erythroleukemia，人类红白血病）STAT6（Signal transducers and activ
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目的 研究重组人白细胞介素13（Recombinant human interleukin 13，rhIL-13）诱导白血病细胞系Dami和HEL（human erythroleukemia，人类红白血病）STAT6（Signal transducers and activators of transcription，信号转导子与转录激活子）磷酸化，部分阐明IL-13的信号转导通路。 方法 1．细胞培养：Dami、HEL细胞用含10％小牛血清的RPMI 1640培养液培养，37℃，5％ CO2。取生长状态良好的细胞，调整细胞密度为8×108～1×109／L，在细胞因子诱导前先经无血清培养20h。 2．总RNA提取：以rhlL-13（100μg／L）分别诱导Dami、HEL细胞不同时间，提取各组总RNA，通过RNA电泳判断其是否符合实验要求。 3．RT-PCR方法：检测rhIL-13作用Dami、HEL细胞0、4h、12h，IL-4受体α（IL-4Rα）的mRNA表达。 4．Western blot方法：取生长状态良好的Dami、HEL细胞，调整细胞密度为8×108～1×109／L，经20h的无血清培养后，用rhIL-13（100μg／L）分别作用0、1h、2h、4h、8h，RIPA buffer裂解细胞提取蛋白质，用Western blot方法检测总STAT6蛋白以及p-STAT6（phosphorylated STAT6，磷酸化STAT6）蛋白的表达。 结果 1．Dami细胞表达STAT6蛋白，rhIL-13诱导2h，STAT6蛋白磷酸化，4h去磷酸化。
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