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漆酶是多铜氧化酶家族的成员之一,它含有四个典型铜离子,Ⅰ型铜用于将多酚类底物还原的电子传递给Ⅱ和Ⅲ型铜组成的三铜核心簇,氧气进入漆酶后在三铜核心簇与传递而来的质子和电子反应形成水,整个过程不含其它副反应,因而是环境友好型酶。同时,因为漆酶底物特异性较低,小分子介体可进一步拓宽漆酶作用的底物范围,使得漆酶受到工业应用领域,包括染料脱色应用的青睐。本文从实验室前期筛选菌株Cerrena sp. HYB07出发,克隆得到多条漆酶基因(包括启动子)及cDNA序列,并进行了生物信息学分析；3条漆酶基因在毕赤酵母中进行异源表达,并对高效表达策略进行初步探讨；对表达的重组漆酶进行酶学性质表征和脱色应用研究,具体研究结果如下：1、通过简并PCR、TAIL-PCR和Site-Finding PCR共克隆出6条新的漆酶同工酶基因,与已知的4条漆酶基因共同构成HYB07漆酶同工酶家族,都具有担子菌漆酶的典型结构特征,上游启动子序列包含了多个顺式作用元件,根据内含子特点、氨基酸组成比例、序列比对、保守性和进化分析,预测Lac3、Lac6和Lac8将具有特殊的生理生化特性。2、共构建了7个pPICZα-Iac载体,将其中的pPICZα-Lac3、Lac6和Lac8转入毕赤酵母X33中进行异源表达和筛选,并通过培养基优化、密码子优化、信号肽选择等高效表达策略的探索,使rLac6在28℃发酵16d达到最高表达量6.33 U·mL=1,并将其进行分离纯化和反应动力学测定。3、通过比较HYB07漆酶和重组漆酶的酶学性质可以发现,HYB07家族的漆酶最适pH为3.0-3.5,最适温度为30-55℃,当pH≥4和<50℃时稳定,对7种常见的水互溶性有机溶剂具有较强的耐受性,Cu2+、Al3+和Mn2+对部分漆酶有促进作用,对EDTA、曲酸和TritonX-100有较强的耐受能力,纯化后的漆酶对多种有机溶剂、金属离子和抑制剂耐受能力得到提高。4、HYB07漆酶发酵液对两种来源的工业废水脱色率达80.3%和58.8%,并可对偶氮类、三苯甲烷类、蒽醌类、靛类等19种染料具有良好的脱色效果,重组漆酶即可直接用于染料脱色,无需分离纯化,因而具有广泛的工业应用前景。