目的观察同源性狗间充质干细胞(MSCs)与心肌细胞(CMCs)非接触法共培养对提高心肌细胞的存活率和生长支持作用,为使用富含生物活性因子的条件培养基替代直接使用间充质干细胞移植寻找依据。方法从狗骨髓分离和培养MSCs,同时通过酶消化法从狗的心脏中分离培养新鲜的原代成体CMCs,然后采用单独培养CMCs或与MSCs非接触共培养方式进行细胞体外培养实验。倒置显微镜下观察随着培养时间的推移,MSCs和CMCs的形态和生长情况。采用流式细胞术检测MSCs的表面抗原表达情况。在培养的第1天和3天测量两种培养条件下CMCs的生存能力。采用高分辨率氧成像法测量CMCs线粒体呼吸功能参数。使用心肌细胞收缩与离子浓度测定系统测定CMCs肌节收缩和钙瞬变情况并将单独培养的CMCs和与MSCs共培养的CMCs进行比较分析。结果MSCs光镜下为长纤维样细胞,表达间充质干细胞的标志物,不表达造血细胞标志物。酶解法分离新鲜成体CMCs呈棒状,边缘清晰,有清晰的横纹。随着培养延长,CMCs细胞的边缘及横纹逐渐不清晰,消失并最终挛缩,碎裂。在与MSCs非接触共培养条件下,CMCs的存活率有所提高。与MSCs共培养的CMCs形态保持和生存能力明显高于单独培养的CMCs(P<0.05)。在第1天和第3天对存活的细胞线粒体进行检测,发现单独培养和与MSCs共同培养的CMCs均具有足够的线粒体膜电位。同样,高分辨率氧成像显示,两种培养条件下的CMCs线粒体呼吸及耗氧量没有差异。比较细胞收缩力和钙离子的变化,发现共培养和单独培养的CMCs细胞间也无显著差异(P>0.05)。结论CMCs与MSCs通过非接触共培养的方式可提高CMCs的存活率和生存能力,而且这种培养方式不会影响CMCs的线粒体耗氧和肌纤维的收缩功能。