聚合物量子点荧光免疫探针的合成及其在亚胺硫磷检测中的应用

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农药残留危害人体健康乃至生命安全。传统的农药残留检测方法主要有色谱法、质谱法等,这些农残分析技术检测通常需要经过繁杂的样品前处理,成本高、时间长、操作复杂,不适合于现场检测及可视化检测。建立灵敏度高、选择性好、分析速度快的原位可视化方法用来检测农药,可以满足食品安全现场检测的需要。  传统的量子点主要是镉基量子点,存在重金属污染,因此制各和应用环境友好材料的探针十分必要。本文构建了基于聚合物量子点的荧光探针,实现对苹果表面亚胺硫磷残留进行半定量可视化检测,以及湖水样、蔬菜和水果样品中亚胺硫磷的超灵敏、高选择性定量检测,具体内容如下:  (1)基于一种新型的亚胺硫磷荧光免疫探针建立了苹果表面半定量可视化测定亚胺硫磷的新方法。将采用简单超声方法合成发光性能优良、带羧基的聚苯撑乙烯衍生物纳米粒子(PDs),与通过用Marnich方法合成的亚胺硫磷抗原免疫5只新西兰大白兔得到的亚胺硫磷抗体,运用共价结合方式进行偶联,得到能特异性识别亚胺硫磷的荧光探针(PDs-Ab)。该探针能直接用于苹果表面亚胺硫磷的荧光成像,实现原位可视化半定量检测,紫外灯下可观察到苹果表面亚胺硫磷浓度为500μg/L(国标规定亚胺硫磷最大残留限量)呈现很强的荧光,浓度低至100μg/L也可以明显看到其产生的荧光,表明该探针检测亚胺硫磷的灵敏度满足实际样品测定的要求。  (2)基于聚二甲基硅氧烷(PDMS)薄片建立了一个超灵敏测定亚胺硫磷的荧光免疫新方法。基于亚胺硫磷与聚二甲基硅氧烷(PDMS)薄片之间的疏水作用力,以及亚胺硫磷抗原与抗体之间的相互作用,在PDMS薄片上将亚胺硫磷、免疫荧光探针PDs-Ab进行层层组装,达到富集痕量亚胺硫磷,消除过量免疫荧光探针干扰的效果,PDMS薄片上探针的荧光强度与亚胺硫磷浓度呈良好的线性关系,线性方程为:F=26.88 C-21.84(C:ng/L),检出限为0.36 ng/L。将建立的超灵敏测定亚胺硫磷的新方法应用于湖水、橘皮、小白菜中亚胺硫磷的测定,回收率实验(97.22%~103.0%)表明方法可靠,符合分析方法的要求。该方法具有灵敏度高,特异性强等优点,既可以进行半定量原位可视化检测,又可以进行超灵敏度定量检测多种植物中亚胺硫磷残留。
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