【摘 要】
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本论文在成功地进行了毒株的分离,适应性培养以及鉴定之后,从传代的细胞中提取出病毒BL-08的基因组RNA,再采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)对甲肝病毒BL-08进行扩增、克隆
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本论文在成功地进行了毒株的分离,适应性培养以及鉴定之后,从传代的细胞中提取出病毒BL-08的基因组RNA,再采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)对甲肝病毒BL-08进行扩增、克隆、测序得基因组序列nt25-7476。再将HAV BL-08株的基因序列与其它株型进行比较,得到了以下的结果:全长核苷酸序列同源性与MBB株最高,为98.8%;与L-A-1株次之为98.0%,与HM175野毒株的同源性为95.0%。而在氨基酸同源性方面却显示出相反的结果,MBB株和HM175株与BL-08序列的氨基酸同源性分别为98.4%和98.5%。另外,本论文还着重对甲肝病毒BL-08株的5’NTR区进行研究。pHAV/7质粒是由PH.D.Suzanne Emerson提供的,以pEGM载体为骨架,带有HAV HM175株全基因组序列的质粒,全长10358bp。本实验在原有的pHAV/7的基础上,将有内部核糖体结合位点(IRES)的5’NTR区域与BL-08株做相应位置的置换,然后将其和pHAV/7进行比较,从而分析单独的5’NTR区对于HAV病毒生长周期的影响。
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