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目的:反式-橙花叔醇具有广泛的药用价值,如:抗氧化活性,抗菌性,抗肿瘤,抗溃疡等活性,但目前关于反式-橙花叔醇的药动学研究方法还未建立,因此拟建立测定大鼠血浆样品中反式-橙花叔醇浓度的LC-MS/MS方法,为反式-橙花叔醇的药动学研究提供依据。方法:色谱条件:色谱柱为Synergi 4u fusion-RP C18（50 mm×3.0 mm,4μm）;流动相为等度洗脱（40:60）的乙腈-水（含0.1%的甲酸和1 mmol/L乙酸铵）;流速为400μL/min,进样量为40μL,总运行时间为3 min。质谱条件:Turbo V型ESI源,源加热温度为650℃;离子喷雾电压为5.5 kV,气帘气、雾化气和加热气分别为为25 psi、60 psi和65 psi;采用正离子模式下的多反应监测模式;监测离子对、解簇电压和碰撞能量分别为:反式-橙花叔醇221.2/135.2、34 V、15 eV;磺胺甲噁唑（内标）254.1/108.1、40V、31eV。取6只大鼠,分别按50 mg/kg灌胃给予反式-橙花叔醇,在给药后的10个时间点从眼眶后静脉丛采血。取50μL血浆样品采用简单的一步乙腈萃取沉淀蛋白。根据《中国药典》2015年版四部、FDA和EMA相关指南,对建立的方法开展方法学验证实验,包括专属性、线性、准确度、精密度、提取回收率、基质效应和稳定性。采用建立的液相色谱-串联质谱法,以磺胺甲噁唑为内标,建立以反式-橙花叔醇峰面积/磺胺甲噁唑峰面积为纵坐标,反式-橙花叔醇的浓度为横坐标的标准曲线,测定其血药浓度,建立药时曲线,并根据非房室模型计算药动学参数。结果:反式-橙花叔醇的血浆标准曲线在0.01-40μg/mL范围内呈良好线性关系,相关系数为0.9972。方法准确度偏差为-3.6-7.4%,日内及日间精密度均≤7.7%。大鼠血浆中反式-橙花叔醇的提取回收率在91.3-94.3%,内标的平均提取回收率为90.5%。稳定性实验表明反式-橙花叔醇能够在分析过程中保持稳定。在完成方法学验证后,该方法成功用于反式-橙花叔醇在大鼠体内的药代动力学研究,并得到了反式-橙花叔醇在大鼠体内的药-时曲线及药动学参数。结论:本研究建立并验证了大鼠血浆中反式-橙花叔醇的LC-MS/MS测定方法,并可以应用于大鼠口服反式-橙花叔醇后的药代动力学研究。本方法专属性、准确度、灵敏度均良好。本研究将为进一步研究反式-橙花叔醇的药理作用及临床应用提供依据。