抗生素电离形态对其植物吸收的影响

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近年来,抗生素的全球消费量保持持续增长趋势。中国是世界上最大的抗生素生产国和使用国,2013年使用量高达16.2万吨。抗生素从受污染的废水或动物粪便向农作物的转移与其理化特性紧密相关,而当前对可电离抗生素的植物吸收机制尚不明确,因此正确认识抗生素在可食用作物中的富集与其性质之间的关系,可为抗生素的人类健康风险评价提供科学依据。本研究选取了磺胺类、喹诺酮类、β-内酰胺类和大环内酯类中7种常用抗生素作为研究对象,首先建立了生菜中多种抗生素的分析检测方法,并在水培条件下,通过改变营养液pH,考察了抗生素的植物吸收与其电离形态的关系。在前人工作的基础上,样品前处理过程考察了乙二胺四乙酸(EDTA)对植物样品中抗生素提取的影响,以及对净化过程进行了优化,再借助超高液相色谱质谱串联仪(HPLC-ESI-MS/MS),建立了一套可同时分析检测生菜中多种抗生素的方法。结果表明,样品前处理过程选择不添加EDTA、并使用N-丙基二乙胺(PSA)净化杂质的方法,对目标抗生素有良好的提取效果。利用改进后的分析方法对生菜样品进行加标回收率实验,结果表明茎叶样品的回收率在95%125%之间,相对标准偏差RSD<10.2%;根部样品的回收率在90%120%之间,RSD<8.3%。因此,该方法对于生菜中多种抗生素的提取具有良好的适用性。为考察抗生素的植物吸收与其电离形态的关系,选择5、6、7、8、9五个pH值在50μg/L的暴露水平下,比较了生菜对目标抗生素的吸收差异。结果表明,7种抗生素在生菜根部和茎叶内均有检出。随营养液pH值的升高,磺胺嘧啶、磺胺甲恶唑在根部的累积量明显下降,抗生素离子形态分析表明中性形态的磺胺类抗生素更易于被植物根系吸收。根细胞内外pH值的变化导致磺胺类抗生素在进入细胞后发生电离,与带负电的细胞膜之间产生电排斥作用,从而被捕获在根部细胞内,抑制其向地上部分运输。氟苯尼考在细胞内外均以中性形态为主,可以更容易随蒸腾流向地上组织运输,具有较大的易位因子(TF)。对目标抗生素的生物富集因子(BCF)与经pH校正后的正辛醇-水分配系数(Dow)相关性分析发现,磺胺嘧啶、磺胺甲恶唑、甲氧苄啶和克拉霉素四种抗生素log BCFroot与log Dow之间存在良好的正相关关系,R2均大于0.8,进一步证明这几种抗生素的根系吸收主要与其中性形态相关。
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