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目的 探讨β-二氢青蒿素-大黄素复合物(复合物B)对人宫颈癌Hela细胞增殖、迁移和凋亡的影响,并探讨可能的分子机制,为今后开发复合物B作为新型抗宫颈癌治疗药物提供可靠的实验依据。方法 复合物B作用于人宫颈癌Hela细胞后,采用MTT法检测复合物B对人宫颈癌Hela细胞增殖的影响;用HE染色、Hoechst33258染色、AO/EB双荧光染色检测形态学和凋亡;采用细胞划痕实验检测细胞迁移的影响;采用流式细胞术检测细胞周期;采用Western Blotting方法和免疫细胞化学染色法检测周期蛋白Ki-67及凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Fas、Bcl-2等蛋白的表达水平。结果 1.MTT法实验结果显示:复合物B可抑制人宫颈癌Hela细胞的增殖,并呈时间和剂量依赖性;2.细胞形态学观察结果显示:(1)倒置显微镜观察显示,空白对照组的Hela细胞生长状态较好,实验组Hela细胞变皱,体积缩小,间距增大;(2)HE染色结果显示,空白对照组细胞染色均匀,细胞核被染成蓝色,胞核及细胞结构完整,而实验组细胞皱缩,胞核深染,且不均一,呈蓝黑色;(3)AO/EB双荧光染色结果显示,空白对照组细胞大多呈绿色荧光;实验组细胞大多呈现黄绿色荧光;(4)Hoechst33258荧光染色结果显示,空白对照组细胞呈均一的淡蓝色荧光;实验组细胞胞核呈环状或半月形,发出较暗的蓝白色光,甚至有些细胞已破碎,呈点片状的蓝白色荧光;3.细胞划痕实验结果显示:复合物B处理Hela细胞24h、48h与对照组比较均可显著抑制迁移距离(P<0.01);4.流式细胞仪检测结果显示:(1)空白对照组细胞大多处于S期(72.23±5.27),其次为G1期(27.27±5.13),而实验组细胞S期比例显著下降(23.03± 1.11),G1期显著上升(72.10±2.83)(均P<0.01);(2)空白对照组细胞凋亡率为4.52±1.23,实验组细胞凋亡率上升为37.68±4.02(P<0.01);5.免疫细胞化学染色、Western Blotting实验结果显示:经复合物B可上调Hela细胞的Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Fas 蛋白表达(P<0.01),而下调 Bcl-2 和 Ki-67 蛋白的表达(P<0.01)。结论 1.复合物B可抑制人宫颈癌Hela细胞的增殖和迁移,并诱导细胞凋亡;2.复合物B可通过阻滞Hela细胞周期于G1期抑制其细胞增殖并诱导其凋亡;3.复合物B诱导Hela细胞凋亡,与内源性及外源性细胞凋亡途径相关;4.复合物B可抑制Hela细胞的迁移,其作用机制有待进一步研究。