论文部分内容阅读
背景:SATB1(special AT rich sequence binding protein)可以调控多种基因的表达,其诱导的基因表达的变化符合上皮-间质转化(epithelial to mesenchymal transition,EMT)的特征,而EMT可使分化的乳腺上皮细胞获得干细胞的特性;Wnt/β-catenin信号通路能调控肿瘤干细胞的自我更新和分化,在乳腺癌发生发展中起着重要作用。作为Wnt/β-catenin信号通路的重要成员,β-连环蛋白(β-catenin)的稳定性对Wnt/β-catenin信号转导有重要意义。本研究在建立乳腺癌干细胞培养技术的基础上,观察SATB1、Wnt1及β-catenin在乳腺癌细胞及乳腺癌干细胞中的表达差异情况,初步探讨SATB1、Wnt1及β-catenin在乳腺癌干细胞中的意义。方法:1、培养乳腺癌细胞MCF-7,用悬浮培养法富集乳腺癌干细胞,流式细胞术鉴定乳腺癌干细胞;2、RT-PCR法检测SATB1、Wnt1及β-catenin在乳腺癌细胞及乳腺癌干细胞中mRNA的表达量;计算SATB1、Wnt1及β-catenin在乳腺癌干细胞中的相对表达量,对结果用SPSS19.0统计软件进行统计分析。结果:1、成功构建目的基因重组质粒并制作标准曲线;2、采用上述SATB1标准曲线对SATB1基因进行定量,结果显示与乳腺癌细胞相比,SATB1在乳腺癌干细胞中的表达明显上调,差异具有统计学意义(P<0.05);3、采用上述Wnt1标准曲线对Wnt1基因进行定量,结果显示Wnt1在乳腺癌干细胞中的表达高于其在乳腺癌细胞中的表达,差异有统计学意义(P<0.05);4、采用上述β-catenin标准曲线对β-catenin基因进行定量,结果显示β-catenin在乳腺癌干细胞与乳腺癌细胞中的表达无显著性差异(P>0.05)。结论:SATB1、Wnt1基因在乳腺癌干细胞中的表达高于其在乳腺癌细胞中的表达,提示SATB1与Wnt/β-catenin信号通路可能在乳腺癌干细胞自我更新调控中发挥作用,本研究所建立的方法及初步观察结果为今后进一步研究SATB1及Wnt/β-catenin信号通路在调控乳腺癌干细胞自我更新方面的机制奠定基础。