背景系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE）是一种常见的的自身免疫性疾病,以产生多种针对自身核酸及其所结合蛋白的抗体,形成自身抗原-抗体免疫复合物为特征。中性粒细胞（polymorphonuclear neutrophil,PMN）死亡时释放出染色质,形成中性粒细胞胞外诱捕网（Neutrophil extracellular traps,NETs）,同时释放多种胞内成分如髓过氧化物酶（MPO）、组蛋白、各种蛋白酶及抗菌肽LL37等物质。目前研究表明,中性粒细胞释放NETs及胞内物质是SLE自身抗原的主要来源,也是引起狼疮病情加重的重要原因,所以阻止中性粒细胞释放NETs是系统性红斑狼疮治疗的重要靶点。课题组前期研究发现,抑制MLKL（mixed lineage kinase domain-like）的磷酸化,可以阻止中性粒细胞释放NETs。MLKL是细胞程序化坏死的最终执行分子,MLKL磷酸化后形成寡聚体,转移至细胞膜形成一个选择性的阳离子通道,最终导致细胞膜的破裂和细胞坏死。因此,我们认为MLKL在NETs释放过程中起到重要作用,成孔蛋白MLKL的活化可能是NETs释放的关键环节,抑制MLKL的活化,阻止中性粒细胞释放NETs可能是系统红斑狼疮的一个新的治疗靶点。目的本课题旨在探讨抑制MLKL活化阻止中性粒细胞释放NETs在SLE的发病及治疗中的意义。方法分离SLE患者及健康志愿者外周血中性粒细胞并提取细胞总蛋白,检测中性粒细胞成孔蛋白pMLKL表达;体外实验,抑制MLKL活化是否能阻止中性粒细胞胞释放NETs;动物实验,通过应用MLKL抑制剂或MLKL基因敲除小鼠构造狼疮小鼠模型,观察抑制MLKL活化阻止中性粒细胞释放NETs对狼疮小鼠病情的影响。结果SLE患者及健康志愿者相比,SLE患者外周血中性粒细胞pMLKL蛋白增加,而健康志愿者未发现pMLKL蛋白表达。体外实验,细胞免疫荧光结果显示PMA刺激中性粒细胞释放NETs的过程中,pMLKL与NETs产生了共定位,同时应用Nec-1抑制MLKL的活化后无论是在酶标仪定量检测还是荧光显微镜下都可以见到PMA诱导的NETs形成减少。体内实验中,对正常狼疮小鼠模型应用Nec-1后明显较未特殊处理的狼疮小鼠尿蛋白及肾脏病理提示发病减轻,并且在MLKL基因敲除鼠上得到了验证。结论MLKL的活化与系统性红斑狼疮发病具有重要联系,抑制MLKL的活化可能通过抑制NETs的产生进而抑制了系统性红斑狼疮的发病。