沙棘Frankia侵染草本植物结瘤的研究

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氮是组成蛋白质和核酸的重要成分,地球上氮素来源主要包括:人工固氮、高能固氮和生物固氮。近年来高效无污染的生物固氮越来越受到全球的关注,而构建植物与固氮微生物形成共生固氮体系是研究的方向之一。本文首次利用沙棘弗兰克氏菌侵染非豆科草本植物形成根瘤并对根瘤进行显微结构的观察,不仅对非豆科植物与弗兰克氏菌形成固氮共生体系的研究具有理论意义,而且也为弗兰克氏菌菌肥的制备提供参考。利用自制培养基从沙棘根瘤中分离出一种放线菌,并进行了形态学鉴定、回接实验、固氮酶活性的测定和冷冻干燥保存。结果表明:沙棘Frankia sp.Hrz06有菌丝、孢囊、泡囊三种结构。弗兰克氏菌经发酵罐发酵,冷冻干燥保存,得到4-5g/L菌体。经复活后,固氮酶活性为1200.4nmol·g-1·h"-1,相当于沙棘根瘤固氮酶活性的70%。利用菌体对沙棘枝条回接侵染,沙棘能接出根瘤。本文利用从沙棘根瘤中分离出的沙棘弗兰克氏菌对没有根瘤的豆科草本植物决明,禾本科草本植物玉米、小麦、高粱和锦葵科草本植物黄秋葵进行了结瘤实验并对根瘤进行了显微结构观察。采用土培培养的方式,利用2,4-D诱导沙棘Frankia sp.Hrz06与玉米、小麦、高粱、黄秋葵、决明结瘤。其方法是设立3个实验组,分别为同时施用2,4-D和菌悬液、先施用2,4-D后接种菌悬液、先接种菌悬液后施用2,4-D。结果表明,同时施用2,4-D和菌液的实验组,玉米、小麦、高粱、黄秋葵和决明均可结瘤,结瘤率分别为2%、5%、2%、40%、80%。先施用2,4-D后接种菌液的实验组,玉米、小麦、决明的结瘤率分别为0%、0%、0%、0%、20%。先接种菌液后施用2,4-D的实验组,玉米、小麦、决明的结瘤率分别为0%、0%、0%、0%、50%。从玉米、小麦、高粱、黄秋葵、决明和沙棘根瘤的石蜡切片和超薄切片中可以看到有弗兰克氏菌以菌丝、泡囊两种结构。本文还测定了决明根瘤的固氮酶活性,结果显示决明根瘤的固氮酶活性和弗兰克氏菌的固氮酶活性相差不大,都是沙棘根瘤的固氮酶活性的70%。
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