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众多瞬时受体势(TRP)通道是可以检测环境变化的生物传感器。基于氨基酸序列同源性，被分为7个亚家族。为鉴定TRP调节剂，分析TRP功能，构建稳定表达TRP的细胞系是非常必要的。在本研究中，我们选择了TRPV3及TRPA1两种靶体，构建表达TRP的稳定细胞系，以期成为功能分析TRP蛋白的有用工具，并可用于快速建立基于细胞的高通量药物筛选试验，鉴定TRP调节剂。
TRPV3通过调节Ca2+选择性离子传输响应非有害热及特异化合物的作用。TRPV3是作用于与炎症状态有关的超敏反应的备选传感器。目前的研究已表明TRPV3是药物研发中非常有希望的靶体，因此倍受瞩目。
为发现TRPV3调节剂，通过荧光成像分析系统检测钙浓度，建立高通量筛选TRPV3调节剂的细胞模型。利用分子克隆技术，构建了TRPV3表达载体(pcDNA3.1/Hygro(+)/TRPV3)。将TRPV3表达载体转染人胚肾(HEK-293)细胞，抗生素筛选稳定表达TRPV3的细胞系，选取TRPV3特异性调节剂作用于细胞模型，应用荧光成像分析系统测钙实验检测TRPV3高表达细胞系药理学特征。同时优化了实验条件，包括钙离子敏感荧光染料的优化及DMSO耐受性检测。考察模型的稳定性，并评估应用于96孔板及384孔板进行高通量筛选的可靠性及准确性。获得了高表达TRPV3的HEK-293稳定细胞系，通过TRPV3离子通道调节的钙流信号与TRPV3特异性调节剂成剂量依赖关系，优化得到了最适筛选条件，该模型稳定，灵敏，通过Z因子检测，spiking检测，完全符合高通量筛选需求。利用此细胞模型通过检测钙信号可筛选TRPV3调节剂。
TRPA1是一种对低温敏感的离子通道，除响应温度外，也可被各种刺激性化合物激活，是许多感觉模型的转导通道。建立TRPA1异源表达系统将为药理分析及功能研究提供很大的便利，但是TRPA1的表达会引发细胞毒性，因此构建TRPA1稳定细胞系一直面临着挑战。有报道需利用诱导表达系统或瞬时转染方法克服该问题。
在人胚肾细胞(HEK-293)中非调控的表达TRPA1稳定细胞系在本研究中被首次成功建立。通过逆转录PCR、实时定量PCR、Western blotting实验证实，培养至25代以上，该细胞系仍持续表达TRPA1。选取TRPA1特异性调节剂作用于细胞模型，应用荧光成像分析系统测钙实验检测TRPA1高表达细胞系药理学特征，结果通过TRPA1离子通道调节的钙流信号与TRPA1特异性调节剂成剂量依赖关系。且细胞的钙流及膜电位功能检测也进一步验证了该重组TRPA1细胞系的稳定性及特异性。该TRPA1-HEK细胞系不但是TRPA1功能性分析的便利工具，而且可应用于高通量药物筛选系统，鉴定TRPA1特异性调节剂。