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目的探讨新生儿脐血间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）体外分离、纯化、扩增，以及向成骨及脂肪细胞定向诱导分化的方法与条件。方法无菌条件下收集新生儿脐血60～120ml，枸橼酸钠抗凝，以Ficoll-HyPaque淋巴细胞分离液密度梯度法、沉降红细胞后密度梯度法及CD34+免疫磁珠负选法分离单个核细胞（mononuclear cells，MNCs）。分离获得的MNCs采用L-DMEM培养基+10％胎牛血清或MesencultTM培养基+10％胎牛血清进行MSCs培养传代，获得第3代集落生长细胞作流式细胞仪表面抗原测定并向成骨、脂肪细胞定向诱导分化，成骨细胞钙沉积经茜素红染色，脂肪细胞胞浆油滴经油红染色证实。结果经沉降红细胞后分离的MNCs，使用MesencultTM培养基+10％胎牛血清培养成功率高，第3代可出现明显的集落生长，而另两种方法分离培养的细胞则难以形成集落：集落细胞表面抗原测定表达CD29、CD59、CD71而不表达CD34、CD45及HLA-DR等分子。集落细胞进行成骨、成脂肪细胞定向诱导分化，成骨定向诱导分化的细胞经茜素红染色胞浆中出现有大量的钙沉积；成脂肪定向诱导分化的细胞油红染色示胞浆充满油滴空泡。结论新生儿脐血中可分离出MSCs，并可在体外进行培养扩增。以甲基纤维素沉降红细胞后密度梯度离心分离的MNCs培养较为有效，集落细胞表达基质细胞表面抗原，能够向成骨细胞、成脂肪细胞定向诱导分化。目的探讨人脐带静脉内皮下间充质干细胞体外分离、扩增与成骨、成脂肪细胞分化的方法与条件。方法脐带先用无菌生理盐水冲洗，去除脐静脉中的瘀血，再沿静脉血管灌入12～15ml含1mg／mlⅡ型胶原酶的磷酸盐缓冲生理盐水（PBS），6～8h后灌洗离心，获取细胞培养、扩增，细胞呈集落生长后传代，取传代细胞进一步行免疫表型测定和诱导向成骨、成脂肪细胞分化。结果这种脐带静脉内皮下细胞分离法，可获得贴壁生长的细胞，呈短棒状或梭形样，易扩增和形成集落，有基质细胞免疫表型表达，成骨诱导分化的细胞经茜素红染色胞浆中有大量的钙沉积，成脂肪诱导分化的细胞经油红染色示胞浆充满了油滴空泡。结论脐带静脉内皮下存在有具间叶细胞分化能力的间充质干细胞，并可在体外进行培养扩增形成集落细胞传代，传代细胞表达基质细胞表面抗原，能够向成骨细胞、成脂肪细胞分化。