基于配体识别决定区印迹的鹅膏毒肽量子点荧光传感器的研究

来源 :华南师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sven55
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在我国,误食毒蘑菇导致中毒的事件屡见不鲜,其中的鹅膏菌毒素为致命“元凶”。按结构和性质,可将该类毒素分为鹅膏毒肽、鬼笔毒肽和毒伞素三类,其中α-鹅膏毒肽的毒性和致死率最高。如今,有关α-鹅膏毒肽的血液检测都是通过高效液相色谱或其联用质谱、电化学仪器实现的,但血液前处理步骤繁琐,后续测试时间长,成本花费过高,所以研制出一种能用于直接快速检测血清中的α-鹅膏毒肽的传感器在快速诊断和急救领域是个十分重要的课题。  依据抗原决定基印迹法的原理,以α-鹅膏毒肽分子构型中色氨酸关键部位,设计并合成出α-鹅膏毒肽特异性识别决定区为模板,利用计算机模拟技术筛选出甲基丙烯酸和4-乙烯基吡啶为功能单体,分别通过氢键和π-π堆积作用与模板构成超分子识别。再以N,N-亚甲基双丙烯酰胺为交联剂,过硫酸铵为引发剂,成功合成出对α-鹅膏毒肽有识别能力的分子印迹聚合物(MIP),从而构建出可直接而快速检测出血清中的α-鹅膏毒肽的光学传感器。利用改性后的碳量子点和CdTe量子点两类量子点为信号放大器,将MIP修饰到QDs上(MIP-QDs),用于加标α-鹅膏毒肽的血清样检测,得到一定的效果。为证明这一效果,分别对单体和模板之间的比例进行了优化,并就可能影响荧光强度的因素——检测液pH、温度、离子强度和时间响应性也进行了优化,同时在这一优化条件下进行了MIP-QDs对α-鹅膏毒肽的荧光滴定实验,得出印迹因子为2.97(MIP-CDs)和3.02(CdTe@MIP),检出限为15ng/mL和8ng/mL,证明MIP-QDs对α-鹅膏毒肽具有很好的专一性。与此同时,考察了包括模板、α-鹅膏毒肽、N-乙酰色氨酸、色氨酸、谷胱甘肽和牛血清蛋白在内的类似物,以及不同阴阳离子的干扰,证明MIP-QDs对α-鹅膏毒肽具有良好的选择性。实际样品的直接检测得出97.8%-100.9%(MIP-CDs)和96.7%-101.7%(CdTe@MIP)的回收率结果,表明这一方法的可行性。
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