丝状真菌粗糙脉孢菌（Neurospora crassa）是自然界的纤维素降解菌,含有大量的纤维素酶以及半纤维素酶基因,且生长迅速,具有良好的开发应用前景,本研究旨在优化粗糙脉孢菌发酵条件,提高粗糙脉孢菌产纤维素酶的能力。（Ⅰ）单因素发酵条件包括孢子接种量、装载体积以及光照等对粗糙脉孢菌野生型菌株产纤维素酶的影响。研究表明:（1）孢子浓度为OD₆₀₀=0.04时,发酵液酶解滤纸以及羧甲基纤维素的酶活达到最大值;（2）发酵液装载量为60%时,发酵液的纤维素酶活力与蛋白浓度达到最大值;（3）将粗糙脉孢菌置于黑暗、300 Lux的照度以及黑暗和光照交替（12小时相互交替）等不同光照条件下进行培养,光照更有利于微晶纤维素Avicel诱导粗糙脉孢菌产纤维素酶。（Ⅱ）响应面优化法（RSM）对粗糙脉孢菌野生型菌株发酵产纤维素酶的培养条件进行优化,以纤维素酶酶活及蛋白浓度作为响应值,用Design-Expert设计三因素20次的响应面试验,建立回归模型。研究表明,最佳的发酵条件是温度为22.5℃、pH为6.25、转速为200 rpm。该条件下的发酵液酶解羧甲基纤维素的活性达到1.23mg/L,酶解滤纸的活性达到1.55m g/L,蛋白浓度达到162 mg/L。（Ⅲ）为表面活性剂对粗糙脉孢菌产纤维酶的影响,分别以粗糙脉孢菌野生型菌株与短菌丝单基因敲除体DJS1作为出发菌株,以Triton X-100作为发酵液添加剂,野生型菌株发酵液酶解滤纸的活性并无显著提高;短菌丝单基因敲除体菌株DJS1,在0.05g/L或0.1g/L Triton X-100的存在下,发酵液酶解滤纸的活性提高两倍以上,达到3.2 g/L。